ELISA包被缓冲液(1×)100ml售后服务使用注意事项
1.微量试剂取用前请离心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4.本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
ELISA包被缓冲液(1×)100ml售后服务操作方法
1.悬浮细胞离心(2000rpm离心5min)收集;贴壁细胞用胰酶消化收集用PBS洗涤细胞二次(2000rpm离心5min)收集1~5×105细胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混匀;室温、避光、反应5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞;
4.请在1 hour内,进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A.荧光显微镜观察
1.滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上,并用盖玻片盖上细胞;
2.对于贴壁细胞来说,也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡;
(1)将细胞于盖玻片上生长,用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡,并设立阴性对照组;
(2)用PBS洗涤细胞两次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混匀;
(4)将上述溶液滴加于盖玻片表面,使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖;
(5)避光、室温反应5 min。
3.将盖玻片倒置于载玻片上,于荧光显微镜下观察激发波长546nm,发射波长647 nm,7-AAD荧光信号呈红色。
B.流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测,激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
ELISA包被缓冲液(1×)100ml售后服务实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的胰酶消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的胰酶消化时,注意必须彻底清除EDTA:在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTA与Ca2+螯合,影响Annexin V的结合。
(1)用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer;
(2)细胞收集。悬浮细胞收集:离心5分钟;贴壁细胞:用不含EDTA的胰酶消化收集后(注:胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-FITC的结合),于室温2000rpm离心5~10分钟,收集细胞;
(3)细胞洗涤:用预冷1×PBS(4℃)重悬细胞一次,2000rpm离心5~10分钟,洗涤细胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞;
(5)Annexin V-FITC标记:加入5μL的Annexin V-FITC混匀后,避光,室温孵育15分钟;
(6)PI标记:上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
(7)上机前,补加200μL的1×Binding Buffer。
CXCL11 Protein Human 重组人 I-TAC / CXCL11 蛋白
人淋巴内皮细胞完全培养基 100mL
NXPH1 Others Mouse 小鼠 Neurexophilin-1 / NXPH1 人细胞裂解液 (阳性对照)
CCC-HSF-1细胞,人皮肤成纤维细胞 粘质沙雷伯氏菌 ZG仓鼠肺细胞;CHL
C57BL/6小鼠T细胞淋巴瘤细胞;RMA
NCI-N87(人胃癌细胞) 5×106cells/瓶×2 人 VSIG8 人细胞裂解液 (阳性对照)
A549/DDP, 人肺腺癌耐药细胞株
EGFR Others Human 人 EGFR / HER1 / ErbB1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人胚胎皮肤成纤维细胞;HES
FaDu细胞,人咽鳞癌细胞 人淋巴细胞与仓鼠肺细胞杂交细胞,FD4细胞 CL-0379MCF 7B(人癌细胞)5×106cells/瓶×2
ZG仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA
IL1RAPL1 Others Human 人 IL-1R8 人细胞裂解液 (阳性对照)
PCNA Others Human 人 PCNA 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人上皮细胞RNAHMEpiC miRNA5 μg
非洲绿猴肾细胞;VERO
HEL299细胞,红白细胞白血病细胞 巨核细胞,Dami细胞 人纤维肉瘤细胞;HT-1080
KM小鼠脑神经胶质母细胞瘤瘤株;G422
CD226 Others Mouse 小鼠 DNAM-1 / CD226 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠热休克蛋白70(HSP-70)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人胎儿血红蛋白(HBF)免疫试剂盒 Human fetal hemoglobin,HBF ELISA Kit
双缩脲法蛋白含量测试盒 可见分光光度法 50管/48样
RatTotalbileacide,TBAELISA试剂盒大鼠总胆汁酸(TBA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanLinkerforactivationofTcell,LAISA试剂盒人T细胞活化连接蛋白(LAT)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanOrexinAELISAKit人阿立新A(OrexinA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
兔基质金属蛋白酶1(MMP-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human folic acid (FA) ELISA Kit 人叶酸(FA)ELISA试剂盒
HumanPoliomyelitisVirus,PV-IgGELISAKit 人脊髓灰质炎病毒IgG(PV-IgG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanGlucosetransporter3,GLUT3ELISA试剂盒人葡萄糖转运蛋白3(GLUT3)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织单胺氧化酶(MAO)总活性化学发光法定量检测试剂盒20/50次
Humanmucosaeassociatedepitheliachemokine,MECELISAKit人粘膜相关上皮趋化因子(MEC/CCL28)ELISA试剂盒规格:96T/48T
ELISA包被缓冲液(1×)100ml售后服务鸡免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
鸡免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
鸡免疫核糖核酸(Irna)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
鸡卵黄高磷蛋白磷酸肽(PPP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装