硼酸盐缓冲液(BBS,pH8.4)500ml售后服务实验操作步骤:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ,其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推;对于细胞悬液每50~100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液(5 ×),混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置:
把试剂盒中提供的CCCP(10mM )推荐按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中,稀释至10uM ,处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ,进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞,通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会完全丧失,JC-1 染色后观察应呈绿色荧光;而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞,CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同,需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞:
(1)取 10~60 万细胞,重悬于 0.5mL 细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
(3)在孵育期间,按照每 1mL JC-1 染色缓冲液(5×)加入 4mL 蒸馏水的比例,配制适量的JC-1 染色缓冲液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育结束后,600g 4 ℃离心3 ~4 分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。
(5)用JC-1 染色缓冲液(1×)洗涤 2 次:加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心 3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。
(6)再用适量 JC-1 染色缓冲液(1×)重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
硼酸盐缓冲液(BBS,pH8.4)500ml售后服务注意事项
(1)本试剂只适用于实验,不适用于临床检测;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙锭)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察;
(4)整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作,以免影响细胞状态。
(5)在细胞洗涤的zui后一步,请尽量将上清弃净,以免PBS残留,有可能会影响实验结果。
(6)为防止荧光衰变,宜在1小时内进行流式检测。
(7)PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首先进行Annexin V-FITC染色,zui短可在上机前5分钟再加入PI染色。
SW 780(人膀胱移行细胞癌) 5×106cells/瓶×2
129小鼠胚胎干细胞 The 129 mouse embryonic stem cells
PROCR Others Human 人 Epcr / PROCR 人细胞裂解液 (阳性对照)
U-2 OS细胞,人骨肉瘤细胞 黄绿青霉 人正常细胞;Hs 578Bst
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0922
HIC(人小肠癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠神经干细胞(EGFP标记) 人胚胎,皮肤,肌肉;M-22
家猫皮肤细胞;FCA-S1
ERBB3 Others Human 人 HER3 / ErbB3 (aa 730-1065) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
CL-0097HCT-15(人结肠癌细胞)5×106cells/瓶×2
RBE, 人肝胆管癌细胞 前列腺癌细胞,LNCaP clone FGC细胞 NCI-H661(大细胞肺癌细胞)
小鼠T淋巴细胞瘤细胞;Cyc-Tag(S49)
PLAUR Others Mouse 小鼠 uPAR / PLAUR / CD87 人细胞裂解液 (阳性对照)
狗间叶干细胞(脂肪)(5×105)
人气管上皮细胞RNAHTEpiC miRNA5 μg
小耳猪肺细胞;SEP-L2
615小鼠树突状细胞肉瘤瘤株;DCS 小鼠软骨细胞完全培养基 100mL
细胞名称 种属
EFNA5 Others Mouse 小鼠 EFNA5 / Ephrin-A5 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠视黄醇结合蛋白4(RBP-4)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)免疫试剂盒 Human Glycogen phosphorylase MM,GP-MM ELISA Kit
NADPH-细胞色素C还原酶(NCR)测试盒 可见分光光度法 50管/48样
RatsubstancePreceptor,SP-RELISA试剂盒大鼠P物质受体(SP-R)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanLactateDehydrogenase,LDHELISA试剂盒人乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanNeurokininsB,NKBELISAKit人神经激肽B(NKB)ELISA试剂盒规格:96T/48T
兔子Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human serum amyloid P (SAP) ELISA Kit 人血清淀粉样蛋白P(SAP)ELISA试剂盒
HumanPulmonarysurfatcant-associatedproteinB,SP-BELISAKit 人肺表面活性物质相关蛋白B(SP-B)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanFibrinELISA试剂盒人纤维蛋白(Fibrin)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织ZAP70激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
humanNoradrenaline,NAELISAKit人去甲肾上腺素(NA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
硼酸盐缓冲液(BBS,pH8.4)500ml售后服务人CCAAT增强子结合蛋白β(C/EBPβ)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人cAMP反应元件结合蛋白(CREB)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人C4结合蛋白(C4BP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
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