真菌糖原PAS染色试剂盒3×20ml实验方法使用注意事项
1.微量试剂取用前请离心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4.本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
真菌糖原PAS染色试剂盒3×20ml实验方法操作方法
1.悬浮细胞离心(2000rpm离心5min)收集;贴壁细胞用胰酶消化收集用PBS洗涤细胞二次(2000rpm离心5min)收集1~5×105细胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混匀;室温、避光、反应5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞;
4.请在1 hour内,进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A.荧光显微镜观察
1.滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上,并用盖玻片盖上细胞;
2.对于贴壁细胞来说,也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡;
(1)将细胞于盖玻片上生长,用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡,并设立阴性对照组;
(2)用PBS洗涤细胞两次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混匀;
(4)将上述溶液滴加于盖玻片表面,使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖;
(5)避光、室温反应5 min。
3.将盖玻片倒置于载玻片上,于荧光显微镜下观察激发波长546nm,发射波长647 nm,7-AAD荧光信号呈红色。
B.流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测,激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
真菌糖原PAS染色试剂盒3×20ml实验方法实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的胰酶消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的胰酶消化时,注意必须彻底清除EDTA:在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTA与Ca2+螯合,影响Annexin V的结合。
(1)用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer;
(2)细胞收集。悬浮细胞收集:离心5分钟;贴壁细胞:用不含EDTA的胰酶消化收集后(注:胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-FITC的结合),于室温2000rpm离心5~10分钟,收集细胞;
(3)细胞洗涤:用预冷1×PBS(4℃)重悬细胞一次,2000rpm离心5~10分钟,洗涤细胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞;
(5)Annexin V-FITC标记:加入5μL的Annexin V-FITC混匀后,避光,室温孵育15分钟;
(6)PI标记:上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
(7)上机前,补加200μL的1×Binding Buffer。
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L](小鼠成纤维 5×106cells/瓶×2
小鼠黑色素瘤细胞;B16-F1
CSF2 Others Mouse 小鼠 GM-CSF / CSF2 人细胞裂解液 (阳性对照)
Hep3B2.1-7细胞,人肝癌细胞 人髓母细胞瘤细胞,D341Med细胞 ZG仓鼠卵巢细胞;CTLA4 Ig-24
人海马趾星形胶质细胞cDNAHA-h cDNA
Promocell C-28014 Mesenchymal Stem CellChondrogenic Diff. Medium w/o, 间充质干细胞软骨分化培养基无诱导剂(即用型) 100ml
人SF基质细胞HHGMC
IFNA8 Others Human 人 Interferon alpha-B / IFNA8 人细胞裂解液 (阳性对照)
大耳山羊肾细胞;LDG-2
A549/DDP细胞,耐DDP肺癌细胞 ZG仓鼠肺细胞,CHL细胞 CM-M002小鼠肺血管平滑肌细胞完全培养基100mL
S-180(小鼠肉瘤细胞) 5×106cells/瓶×2
Gibco 10639011 STEM PRO-34- COMBO 500ml
人卵巢上皮细胞(HOSEpiC) ( 5×105 )
人肺癌细胞;A-427 [A427]
CM-R056大鼠肾实质细胞完全培养基100mL
仓鼠/小鼠杂交瘤细胞;145-2C11 小鼠肠静脉内皮细胞完全培养基 100mL
MSC, 小鼠雪旺细胞 Mouse
NEGR1 Others Mouse 小鼠 NEGR1 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒 ,英文名: 8-OHdG ELISA Kit
人雄(ASD)ELISA检测试剂盒HumanAndrostenedione,ASDELISAKit 96T/48T
大鼠多巴胺D2受体(D2R)免疫试剂盒 Rat dopamine D2 receptor,D2R ELISA Kit
CLIAKitforTTN(HumanAnti-titinAntibody)ELISAKit人抗肌联蛋白抗体规格:48T/96T
牛奶维生素A含量荧光定量检测试剂盒20次
ELISAKitsFAS/Apo-1人可溶性凋亡相关因子规格:48T/96T
小鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human glucocorticoid receptor alpha (GR- alpha) ELISA Kit 人糖皮质激素受体α(GR-α)ELISA试剂盒
Humanproteolipidprotein,PLPELISAKit 人蛋白脂质蛋白抗体(PLP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanBH3interactingdomaindeathagonist,BidELISA试剂盒人BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)ELISA试剂盒规格:96T/48T
植物总RNA纯化试剂盒(高多糖/酚)20次
HumanSurfaceMembraneImmunoglobulin,SmIgELISAKit人细胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)ELISA试剂盒规格:96T/48T
真菌糖原PAS染色试剂盒3×20ml实验方法人吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人YZ素B(INH-B)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人YZ素A(INH-A)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人YZ素(INH)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装