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首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。Z后计算浓度时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。
标准品的稀释原则:2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为300 pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5
pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。
如配制150 pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
生物素标记抗体的稀释原则:
临用前以生物素标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则:
临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
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活性蛋白是一种复杂的有机化合物。组成蛋白质的基本单位是氨基酸,氨基酸通过脱水缩合形成肽链。蛋白质是由一条或多条多肽链组成的生物大分子,每一条多肽链有二十至数百个氨基酸残基不等;各种氨基酸残基按一定的顺序排列。
蛋白质的氨基酸序列是由对应基因所编码。除了遗传密码所编码的20种"标准"氨基酸,在蛋白质中,某些氨基酸残基还可以被翻译后修饰而发生化学结构的变化,从而对蛋白质进行激活或调控。多个蛋白质可以一起,往往是通过结合在一起形成稳定的蛋白质复合物,发挥某一特定功能。产生蛋白质的细胞器是核糖体。
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活性蛋白对环境的要求很高,高浓度的生物蛋白在常温下保存很容易失去活性,为了确保这些珍稀成分的特殊活性与功能,只能采取生物冻干工艺,在无菌环境下采用-80度的极
速超低温真空冻干技术,使生物活性蛋白进入休眠状态,达到完整的保存其生物活性的目的。
一方面从源头直接参与皮肤细胞的基因表达与生理信号的传递,修复细胞,阻断老化,另一方面营养肌肤,提高肌肤自身的调节能力,立体构建和维护皮肤的生态环境,实现逆龄护肤。
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近年来,研究人员从多种植物源中药中发现具有较好抗肿瘤作用的蛋白、小分子多肽及糖蛋白。例如糖蛋白可以通过直接杀死肿瘤细胞和促进癌细胞凋亡等途径YZ肿瘤细胞增殖。
免疫调节功能
植物源蛋白是一类潜在的天然免疫调节剂,且对人体毒害小,是近年来国内外研究的热点。植物源蛋白可以通过活化巨噬细胞和淋巴细胞、促进淋巴细胞有丝分裂和细胞因子(TNF-α及NO) 分泌等途径调节机体免疫。
植物源活性蛋白可通过不同途径和机制抵抗对机体有氧化损伤作用的氧化物,从而发挥抗氧化的作用。
体外抗氧
化研究发现植物源蛋白肽类可直接清除自由基而起到抗氧化的作用。
病原微生物作用
细菌、真菌与病毒病害一直是动物、植物和人类的三大类病害,研究发现很多中药具有抗细菌、抗真菌和抗病毒作用,尤其是是对抗真菌的中药研究颇多。同时,研究还发现中药中发挥这些药理活性的成分可能与其含有的大分子物质如蛋白质有关。
血栓栓塞性疾病是涉及到血液和循环系统的疾病,是近年来发病率和致死率较高的疾病。目前临床ZL血栓性疾病的药物按其作用机制可分为3类,分别是抗凝血药、抗血小板聚集药及溶栓药。溶栓药的作用机制主要依赖于促进纤维蛋白溶解系统,体内纤溶酶原在各种激活物的作用下转化为具有催化活性的纤溶酶,将整个纤维蛋白降解成多个小肽,达到溶解血栓的作用
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