特别提示:包括DH5α化学感受态细胞在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床YL及其他非科研用途!
产品名称:DH5α化学感受态细胞
英文名称:DH5α Chemically Competent Cell
产品货号:MQ0001
产品规格:20×100μl/100×100μl
DH5α菌株是实验室zuì常用的感受态细胞。缺失核酸内切酶(endA),提高了质粒DNA的产量和质量;重组酶缺陷型(recA)减少插入片段的同源重组概率,保证了插入DNA的稳定性;lacZΔM15的存在使DH5α可用于蓝、白斑筛选。
DH5α菌株的缺点是生长缓慢,37℃需培 12-14小时才能看见克隆;如需加快试验速度,请选用TG1,Mach1-T1,XL10-Gold等生长速度快的感受态细胞。
DH5α感受态细胞经特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率约1×109cfu/μg。
保存条件:-80℃
基因型:F-φ80 lac ZΔM15 Δ(lacZYA-arg F)U169 endA1 recA1 hsdR17(rk-,mk+)supE44λ-thi-1 gyrA96 relA1 phoA
操作说明:
1.DH5α感受态细胞放置冰中融化(或放手心或室温片刻,待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中),加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀,冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少17h。
注意事项:
1.感受态细胞zuì好在冰上融化。
2.混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒或GX率的连接产物可相应减少zuì终用于涂板的菌量。
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