特别提示:包括细胞质染色试剂盒-C01在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床YL及其他非科研用途!
产品名称:细胞质染色试剂盒-C01
产品货号:HR0610
产品规格:500T
C01细胞质染色试剂盒是利用C 系列探针进行细胞质染色的试剂盒。本试剂盒中的C01细胞质染色探针为绿色荧光标记的细胞质探针,具有490/515nm的zuì大激发/发射波长。
C系列探针是对活细胞的细胞质进行选择性染色的一类荧光染料,该系列探针可以选择性标记细胞质,只需要纳摩尔级(nM)浓度即可有效标记活细胞。
C系列探针可自由穿过细胞膜,适用于观察细胞质内部生物合成及相关发病机理。
C系列细胞质探针具有多种颜色可以选择,可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的绿色荧光探针,还可以提供红色、蓝色、橙色等颜色的染色试剂盒。
C01细胞质绿色荧光探针有极强的疏水性,能够轻易穿透活细胞膜,进入细胞后,被细胞内的酯酶剪切形成膜非渗透性的极性分子CF,从而被滞留在细胞内,使胞质发出强绿色荧光。CA zuì大激发波长490nm,zuì大发射波长520nm。实际检测时推荐使用的激发波长为488nm 左右,发射波长为 510~530nm。可以使用流式细胞仪或激光共聚焦显微镜检测细胞。
除了针对细胞质的C 系列荧光染色产品,还可以为您各种N 系列、M 系列、E 系列、G 系列和L 系列细胞膜、细胞质、细胞核、线粒体、内质网等细胞亚结构荧光染色试剂盒,以及钙离子、钠离子、神经细胞等各种荧光染色试剂盒产品。
储存条件:染料-20℃避光保存;避免反复冻融;稀释液2-8℃保存。
有效期:六个月。
使用前请仔细阅读产品说明书
使用限制:本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或ZL。
产品更新:我司会更新或升级产品,以优化和增强其使用性能,产品说明书会进行相应的版本更新。使用产品时,请参照随产品附带的说明书,不要参照网上下载的说明书,可能是不同的版本。
使用安全:使用时需要合适的实验室外套,一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如果试剂不小心接触皮肤或眼睛,应立即用水冲洗。
注意事项:
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品Pai的试剂混用,否则会影响使用效果。
● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
● zuì好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。
试剂盒以外自备试剂和仪器:
● PBS ● HBSS ●离心机 ●荧光显微镜/激光共聚焦显微镜
使用注意事项:
● C01染色液为DMSO溶液,冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意
需要加热溶解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
● 使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
● C01探针容易受潮,受潮后稳定性较差,注意干燥保存。
● 吸取C01探针母液时要用干燥的新吸头,不能使用含水的吸头。
● 未使用完的C01探针母液请拧紧螺旋盖,避免受潮失效。
● C01探针工作液含水,配制后不可以长期保存,须现配现用。
● 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
●标记的条件因细胞种类而异,根据不同样本的实际染色结果做相应调整,在每次实验前,请先根
据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化,确定zuì佳条件。以下方法仅供参考。
●染色后立即进行分析。
使用方法:
1.染色工作液配制:
根据样本数量,用染料稀释液将L03荧光染料10倍稀释,再用相应的培养基或者HBSS缓冲液50-100倍稀释,配制成染色工作液。
【注】:
● 也可以直接用相应的培养基或HBSS等缓冲液稀释C01染料至所需浓度。
● 建议收到产品后,根据单次使用量,对母液进行小量分装,每次使用一管,试剂-20℃避光冻存,一年稳定。开始实验前,使用培养基或HBSS缓冲液稀释储存液到需要的工作浓度。工作浓度为根据不同细胞的预实验结果确定的zuì佳工作浓度,一般染色终浓度500-1000倍稀释。
● 工作液现配现用。
● 为了降低探针加载过度可能引起的假阳性,建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓度。
● 若细胞在染色后于不含染料的培养基中孵育,荧光信号会衰减。
2.细胞染色
2.1对于贴壁细胞
1)将细胞置于培养皿中的盖玻片上,加入合适培养基,使其爬片生长。
2)待细胞生长到合适丰度,吸除培养液,加入适量37℃预热的含探针工作液。于生长状态下孵育30分钟~2小时(具体孵育时间需根据细胞类型而定)。
3)利用新鲜培养基替换上述染色液并在荧光显微镜(含合适滤片)下观察。
【注】:
● 若染色不够充分,建议增加染料浓度或延长染色时间。
2.2对于悬浮细胞
1)离心,吸除上清。
2)利用37℃预热的探针工作液重悬细胞,于生长状态下孵育30分钟~2小时(具体时间需根据细胞类型而定)。
3)离心,吸除染色液,加入新鲜培养液重悬细胞。
4)置于荧光镜下观察。
【注】:
●对于悬浮细胞,也可将细胞贴附于经细胞粘合剂处理过的盖玻片上,然后使用类似于贴壁细胞的方法进行染色。
● 若染色不够充分,建议增加染料浓度或延长染色时间。
3.观察结果:
在荧光显微镜(含合适滤片)下观察细胞。zuì大激发/发射波长为490/515nm。
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名称:甲基绿-派洛宁染色液(MGP染色液)
货号:YT168
规格:100ml
本染色液是一种组织或细胞染色时常用的可以把细胞核染成绿色或蓝绿色,把细胞浆和细胞核中的核仁染成红色的染色液。甲基绿可以和细胞核中的DNA结合,从而产生细胞核染色;而派洛宁可以和细胞浆或核仁中的RNA结合,从而可以使细胞浆和核仁被染色。改进了染色液配制方法,不含很多甲基绿-派洛宁染色液中使用的剧毒甲醇。本染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用。一方面可以在本甲基绿-派洛宁染色液染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色,另一方面也可以在免疫组化染色后再进行甲基绿-派洛宁复染。一个包装的本染色液至少可以染色200个样品。
注意事项:
1. 需自备4%多聚甲醛、70%乙醇和95%乙醇。如果需要脱水、透明和封片处理,还需自备二甲苯,中性树胶或其它封片剂。如果样品是石蜡切片,需自备90%乙醇,无水乙醇以及二甲苯。
2. 次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。
储存条件:室温避光,有效期一年。
名称:酸性酯酶染液
货号:SNM371
规格:5ml×4
名称:姬姆萨染液(10×)
货号:KFS121
规格:25ml
姬姆萨染料为天青色素、伊红、次甲蓝的混合物,本染色液zuì适于血液涂抹标本、血球、疟原虫、立克次体以及细胞、脊髓细胞等的染色。
染前用蛋白酶等进行处理,然后再用姬姆萨染液染色,在染色体上,可以出现不同浓淡的横纹样着色。姬姆萨染液可将细胞核染成紫红色或蓝紫色,胞浆染成粉红色,在光镜下呈现出清晰的细胞及染色体图像。
试剂盒组份:
10×姬姆萨染色原液 25mL
10×姬姆萨稀释液 25mL
染色步骤1.根据需要量,取8ml 双蒸水,加入姬姆萨原液1ml,再加入姬姆萨稀释液1ml,混匀即为工作液,此工作液常温可保存两周(如果无法短期用完,请确保姬姆萨原液不要见到水或者其他缓冲液)。2.按常规方法制备血涂片,待血膜干后,用甲醇固定2~3 分钟;3.将血涂片或涂片放置染色架上,滴加2~3 滴染色工作液,使覆盖全部血膜(具体用量视样品大小而定),室温染色15~30 分钟。4.用自来水缓慢从玻片一端冲洗(注意勿先倒去染液或直接对血膜冲洗),凉干后镜检。
四、注意事项1.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。2.如果染色过浓或者过淡,请调整姬姆萨原液加入量(姬姆萨原液zuì常用的稀释比例是10 倍,但有时候可能会稀释5 倍或者15 倍)。3.姬姆萨原液采用常规方法配制(姬姆色素:甘油:甲醇=1:66:66),请在使用时小心不要接触到水。否则时间长了会失效。
储存:2~8℃,避光,有效期12个月。
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