SY0762 AEC显色试剂盒红色(IHC)

特别提示：包括AEC显色试剂盒红色(IHC)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床YL及其他非科研用途！

产品名称：AEC显色试剂盒红色(IHC)

英文名称：AEC Peroxidase Substrate Kit for IHC (Red Color)

产品货号：SY0762

产品规格：1kit



AEC（3-amino-9-ethylcarbazole）是3-氨基-9-乙基咔唑的简称，在过氧化物酶的催化下，AEC显色工作液会于反应部位产生溶于酒精的红色沉淀，必须在水溶性介质中复染和封片。本试剂盒采用液体性滴瓶包装，使用方便。



产品组份：



20×醋酸盐浓缩缓冲液（含H2O2, pH5.6）————3ml

20×AEC浓缩液————————————————3ml



操作方法

1）在过氧化物酶孵育完成以后，TBS或PBS 充分洗涤，一般5min/次，共4次。

2）向1ml 蒸馏水中滴加1滴20×AEC浓缩液和1滴20×醋酸盐浓缩缓冲液，混匀，加至标本上。一般避光显色10-30min。若无背景出现则可继续显色。直至显色满意为止。

3）蒸馏水充分洗涤以终止反应。必要时用甲基蓝3-5min或不含酒精的苏木素（Mayer’s）复染。

4）水溶性封片剂封片，显微镜观察。



储存条件：-20℃，有效期一年。



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名称：Western一抗二抗清除剂(中性)

货号：YT073

规格：250ml

本品用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用。在Western中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后，有时还需要检测tubulin、actin等表达量相对稳定的蛋白作为参照，或检测其它蛋白进行比较。通过使用一抗二抗去除液，充分去除一抗二抗，可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白。和重新跑一个SDS-PAGE胶相比，不仅省时省力，而且可以消除重新上样而带来的误差，使可比性更强。



使用Western一抗二抗去除液多次重复使用同一张膜，会导致蛋白信号的减弱。但是，本Western一抗二抗去除液，经过多个抗体的检测试验，通常可以重复利用膜3-5次。使用本试剂只需大约20-30分钟即可实现蛋白膜的重复使用，然后可以进行封闭等后续的Western操作。



百奥莱博的不同的Western一抗二抗去除液主要在去除结合的一抗二抗的原理方面略有不同。分别依靠去垢剂、酸性、碱性、还原剂、螯合剂、盐浓度以及一些特殊试剂等的不同组合来解除一抗二抗的结合，同时又不会导致转移到膜上的蛋白的损失。



抗体清除剂选型表：

产品编号	YT071	YT072	YT073	YT074
产品名称	Western一抗二抗清除剂(强碱性)	Western一抗二抗清除剂(弱碱性)	Western一抗二抗清除剂(中性)	Western一抗二抗清除剂(酸性)
产品包装	250ml	250ml	250ml	250ml
pH	强碱性	弱碱性	中性	酸性
对于膜上蛋白的保留效果	好	好	好	好
对于一抗二抗的去除效果	好	好	好	好
去除一抗二抗所需时间	15-20分钟	20-30分钟	20-30分钟	40-80分钟
适用膜的类型	PVDF和NC	PVDF和NC	仅PVDF	PVDF和NC
腐蚀性	强	弱	无	弱

用于普通的Western检测时蛋白膜上一抗二抗的去除可以任选一种去除液。如果是NC膜，即硝酸纤维素膜时，不宜选用YT071N。从时间角度考虑，强碱性、弱碱性和中性的去除液所需的时间都比较短，可以优先考虑。从价格因素考虑，强碱性的去除液性价比zuì高。从安全性考虑，中性的去除液由于没有腐蚀性而表现出更高的安全性。弱碱性和弱酸性一抗二抗去除液的安全性次之。但只要正确操作，并进行适当防护，使用强碱性的一抗二抗去除液也是完全可行的。

  对于特定的抗原和抗体，很难说哪一种Western一抗二抗去除液的效果zuì好。在遇到一抗二抗去除效果欠佳时，可以考虑适当延长一抗二抗去除液的孵育时间，同时确保孵育时的温度不低于20℃。温度过低时一抗二抗的去除效果会下降。同时也可以考虑尝试其它的一抗二抗去除液，以摸索出zuì佳的适合您实验条件的Western一抗二抗去除液。



注意事项：

1. 使用辣根过氧化物酶(HRP)，任何一次封闭(blocking)都应当使用5%脱脂牛奶，如果使用碱性磷酸酯酶，任何一次封闭都应当使用酪蛋白(casein)。

2. 本Western一抗二抗去除液仅适用于PVDF膜。用于硝酸纤维素膜时会导致转移到膜上的蛋白有非常显著的损失。

3. 使用化学发光试剂进行的Western检测适用本试剂。使用非化学发光试剂进行的Western检测，例如DAB，NBT/BCIP，不适用于本试剂。



储存条件：-20℃，有效期一年。



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