特别提示:包括DH5α化学感受态细胞在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床YL及其他非科研用途!
产品名称:DH5α化学感受态细胞
英文名称:DH5α Chemically Competent Cell
产品货号:SY0012
产品规格:100μl×10管
本品是采用大肠杆菌DH5α菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。本品使用pUC19质粒检测,转化效率可达108 cfu/μg,广泛适用于GX的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。本品适用于蓝白斑筛选,另对recA1和endA1进行特定的改造使其更能保证克隆DNA的稳定性。
DH5α感受态细胞基因型:F-φ80lacZΔM15 Δ(lacZYA-arg ) U169 endA1 recA1 hsdR17 (rk-, mk+) phoA supE44 λ-thi-1 gyrA96 relA1。
储存条件:-80℃
组份:
DH5α感受态细胞 100μl×10
pUC19(0.1 ng/μl) 5μl
注意事项
1)感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。
2)整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。
3)为确保zuì高转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温。
4)为防止转化不成功,可以保留部分连接反应液,以重新转化,zuì低化实验可能遇到的风险。
使用方法
1)取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。
【注】:一次转化感受态细胞的建议用量为50-100 μl,可以根据实际情况分装使用,应注意所用的DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。
2)向100 μl感受态细胞悬液中加入目的DNA,轻轻旋转离心管以混匀内容物,在冰浴中静置30min。
3)将离心管置于42℃水浴中放置45s~60s,然后快速将管转移到冰浴中,使细胞冷却2min,该过程不要摇动离心管。
4) 向离心管中加入900μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床振荡培养45 min~60min(150 rpm), 目的是促使菌体复苏,抗性基因表达。
5)将离心管内容物混匀,吸取100μl已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB或LB固体琼脂培养基上,用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min,待液体被吸收后,倒置平板,37℃培养12-16 h。
【注】:涂布菌液多少可根据转化DNA量来调整。如果预计的克隆较少,可通过离心后吸除部分培养液,重新悬浮菌体后将其涂布在一个平板上。剩余菌液可置于4℃保存,一周之内可重新涂板。
根据您的关注的DH5α化学感受态细胞,DH5α化学感受态细胞,SY0012,百奥莱博,,,您可能还对以下产品有需求:
您可能感兴趣的产品
相关产品
-
供应商产品推荐
-
信息说明
本产品信息由(北京百奥莱博科技有限公司)为您提供,内容包括(SY0012 DH5α化学感受态细胞)的品牌、型号、技术参数、详细介绍等;如果您想了解更多关于(SY0012 DH5α化学感受态细胞)的信息,请直接联系供应商,给供应商留言。若当前页面内容侵犯到您的权益,请及时告知我们,我们将马上修改或删除。
Copyright 2004-2024 yiqi.com All Rights Reserved , 未经书面授权 , 页面内容不得以任何形式进行复制
官方微信
仪器网微信公众号
扫码获取最新信息
在线客服
咨询客服
电话客服: 400-822-6768 工作日: 9:00-18:00
订阅商机
仪采招微信公众号
采购信息一键获取海量商机轻松掌控
|