特别提示:包括厚壁微生物蛋白提取试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床YL及其他非科研用途!
产品名称:厚壁微生物蛋白提取试剂盒
英文名称:Thick wall microbial protein extraction kit
产品货号:HR8079
产品规格:50T|100T
厚壁微生物总蛋白提取试剂盒可以从各种厚壁微生物菌体中提取总蛋白。包括各种难以裂解的酵母、丝状真菌、革兰氏阳性菌、芽孢、微藻、虫卵等有较厚的细胞壁的样品。提取过程简单方便,不需要机械研磨或有机溶剂。该试剂盒含有蛋白酶YZ剂混合物和磷酸酶YZ剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高质量的蛋白提供了保证。该试剂盒提取的蛋白具有天然活性,可用于报告基因检测、SDS-PAGE电泳检测、Western blotting、凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活分析等下游实验。每毫升菌液大概可以提得5-10mg蛋白。采用BCA或Lowry 法进行蛋白定量。
本试剂盒提取的蛋白样品含高浓度的盐成分,不可直接用于2D电泳。如下游实验需要用于2D电泳,需要除盐后再上样。如下游实验需要样品可以直接用于等电聚焦、双向电泳,请使用我公司其他货号的试剂盒。
储存条件:蛋白酶YZ剂-20℃保存;蛋白稳定剂-20℃保存;蛋白提取液室温保存。
有效期:一年。
注意事项:
●本试剂盒仅供科学研究使用。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品Pai的试剂混用,否则会影响使用效果。
● zuì好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
产品特点:
1.使用方便:不需昂贵设备。
2.可以处理各种细菌菌体,包括新鲜菌液和冰冻菌体。
3.将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
4.采用温和的中性裂解组分,保持蛋白活性。
5.含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
6.紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
7.蛋白酶YZ剂YZ了蛋白的降解,蛋白酶YZ剂配方优化。蛋白酶YZ剂混合物包含6种独立的蛋白酶YZ剂;每一种YZ剂可特异性YZ某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以YZ几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
8.本试剂盒中不有EDTA,与金属螯和层析等兼容。
试剂盒以外自备试剂和仪器:
● 移液器、吸头 ●离心机及离心管 ● 涡旋振荡器 ●冰箱,冰盒
使用方法:
使用注意事项:
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2.实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3.蛋白酶YZ剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
4.可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶YZ剂单品。
5.本试剂盒中提取液和蛋白酶YZ剂中均不含EDTA,根据需要可自行加入。
1.裂解液的准备:
根据所需要提取的样本量,每500μl蛋白提取液中加入2μl蛋白酶YZ剂混合物和5μl蛋白稳定液,充分混匀后置冰上备用。
2.在4℃ 12000g条件下将菌液离心5分钟,弃上清,尽量吸干剩余液体,收集菌体。
3.用PBS洗菌体2次。若为冷冻菌体直接进行下面操作步骤即可。
4.按大约每50mg-100mg湿重菌体样本加入500μl蛋白提取液,吹打混匀,振荡20-30分钟。
5.300w,10s超声/10s间隔条件下冰浴超声至菌液变澄清。若无超声条件,可不超声,将上一步骤裂解液处理时间延长,至澄清。
6.在4℃ 12000g条件下将菌液离心10分钟,将上清移入冷的干净离心管。
7.即得总蛋白样品。
8.将总蛋白样品定量后分装置于-80℃冰箱备用或直接用于下游实验。
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