ALH022 微量样品RNA提取试剂盒

特别提示：包括微量样品RNA提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床YL及其他非科研用途！

产品名称：微量样品RNA提取试剂盒

英文名称：Total RNA Extraction Kit From a small amount of sample

产品货号：ALH022

产品规格：50次



本试剂盒zuì小处理量可以处理10个以上的组织细胞。本试剂盒是在无苯酚、lǜ仿RNA快速提取技术基础上，采用基因组DNA清除柱技术确保有效清除gDNA残留，得到的RNA不需要DNase消化，可直接用于PCR、荧光定量PCR等实验。独特的裂解液迅速裂解微量样品的细胞和灭活细胞RNA酶，然后裂解混合物通过一个基因组DNA清除柱，基因组DNA被清除而RNA穿透滤过。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于特制离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除， zuì后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。



试剂盒组份：

裂解液RLT Plus—————————20 ml

去蛋白液RW1———————————40ml

漂洗液RW————————————10ml

RNase-free H2O—————————10ml

70%乙醇————————————10ml RNase-free H2O

Carrier RNA——————————310μg

基因组DNA清除柱和收集管————50套

RNA吸附柱和收集管———————50套

微量研磨杵———————————3根



储存条件：室温，有效期半年。(Carrier RNA需-20℃保存)



产品特点：

1.完全不使用有毒的苯酚，lǜ仿等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。

2.快速，简捷，单个样品操作一般可在30分钟内完成。

3.独特研发成功基因组DNA清除柱技术确保有效清除gDNA残留，得到的RNA不需要DNase消化，可直接用于PCR、荧光定量PCR等实验。

4.多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.9～2.0，基本无DNA残留,可用于RT-PCR，Northern-blot和各种实验。



注意事项：

注意事项

1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。

2. 样品处理量不要超过基因组吸附柱和和RNA吸附柱处理能力，否则造成DNA残留或者产量降低。如细胞处理量不超过5×10^5，组织不超过5mg。

3. 一般本试剂盒zuì小处理量可以处理10个以上的组织细胞。

4. 裂解液RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。

5. Carrier RNA 储存液的配制：在次使用Carrier RNA 时，将Carrier RNA（310μg）溶解在1 ml RNase-free H2O 中，将溶液分装后储存于-20℃，此时该溶液的浓度为310 μg/ m（l 310 ng/μl）；该储存液应避免反复冻融，冻融次数不能超过3 次。（当处理的细胞量小于5000 个或者处理组织量小于10μg时，请在裂解液中加入20ng Carrier RNA。）

6. Carrier RNA 工作溶液的配制（以配制10 次用量为例）：将5μl Carrier RNA储存溶液加入34μl 裂解液RL 中，用移液器混匀，将混匀后的溶液6μl 加入54μl 裂解液RL 中， 此时Carrier RNA 终浓度为4 ng/μl，取5μl 终浓度为4 ng/μl 的Carrier RNA 加入裂解液中。

7. 预防RNase 污染，应注意以下几方面：

1) 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌，可能导致RNase 污染。

2) 使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。

3) RNA 在裂解液RLT Plus 中时不会被RNase 降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase 的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4 小时，塑料器皿可在0.5 M NaOH 中浸泡10 分钟，然后用水彻底清洗，再灭菌，即可去除RNase。

4) 配制溶液应使用无RNase 的水。（将水加入到干净的玻璃瓶中，加入DEPC 至终浓度0.1%( v/v)，37℃放置过夜，高压灭菌。）

8. 关于DNA 的微量残留：

一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留（DNase 消化也无法做到无残留），本试剂盒由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA 清除柱技术，绝大多数DNA 已经被清除，不需要DNase消化，可直接用于反转录PCR和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA 含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA 表达量分析荧光定量PCR，我们建议在进行模板和引物的选择时：

1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA 中的连接区,这样DNA 就不能作为模板参与扩增反应。

2) 选择基因组DNA 和cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。

3) 将RNA 提取物用RNase-free 的DNase I 处理以提GX果。本试剂盒还可以用于DNase I 处理后的RNA 清洁(cleanup),请联系我们索取具体操作说明书。

4) 在步骤去蛋白液RW1 漂洗前，直接在吸附柱 上进行DNase I 处理。请联系我们索取具体操作说明书。



本制品别名：少量样品RNA提取试剂盒|珍稀样品RNA提取试剂盒



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