猴脉络膜-视网膜细胞,(内皮)RF/6A细胞贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml完全培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入完全培养基后继续培养或实验。
猴脉络膜-视网膜细胞,(内皮)RF/6A细胞培悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入完全培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入完全培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入完全培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
猴脉络膜-视网膜细胞,(内皮)RF/6A细胞培养基的配制 培养基 | 品Pai | 货号 |
D-MEM/F-12 | GIBCO | 12400024 |
Dulbecco's Modified Eagle Medium (D-MEM), powder (high glucose) | GIBCO | 12800017 |
F-12 Nutrient Mixture (Ham) powder | GIBCO | 21700075 |
Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM) powder | GIBCO | 12200036 |
Leibovitz's L-15 Medium powder | GIBCO | 41300039 |
McCOY's | | M4892 |
Minimum Essential Medium (MEM) Alpha Medium powder (MEMα) with ribonucleosides and deoxyribonucleosides | GIBCO | 11900024 |
Minimum Essential Medium (MEM) Alpha Medium powder (MEMα) without ribonucleosides and deoxyribonucleosides | GIBCO | 12000022 |
Minimum Essential Medium (MEM) powder | GIBCO | 41500034 |
NUTRIENT MIXTURE F12 HAM KAIGHN'S MODIFICATION (F12K) | SIGMA | N3520 |
RPMI Medium 1640 | GIBCO | 31800022 |
EGF | SIGMA | E9644 |
Sodium pyruvate | SIGMA | P2256-25G |
MEDIUM 199, WITH EARLE'S SALTS AND L-GLUTAMINE, WITHOUT SODIUM BICARBONATE. CELL CULTURE TESTED | SIGMA | M5017 |
2、 按要求添加碳酸氢钠、谷氨酸钠、HEPES等,充分搅拌使之溶解。
3、 调pH至7.2左右。
4、 加水至体积。
5、 在超净台中对溶液进行滤过CJ,分装入250 mL或500 mL玻璃瓶中,用翻帽塞塞紧瓶口。
6、 瓶口封好,4℃冰箱贮存。
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