荧光定量PCR
荧光定量PCR分类:
☆TaqMan荧光探针
PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5‘-3‘外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。
☆SYBR Green荧光染料
SYBR Green是一种DNA结合染料,能非特异地掺入到双链DNA中去。在游离状态下,它不发出荧光,但一旦结合到双链DNA中以后,便可以发出荧光。它的优点就是可以与任意引物、模板相配合,用于任意反应体系中。从经济角度考虑,它也比其它的探针的价格要便宜得多。但由于它能与所有的双链DNA结合,所以一旦反应体系中出现非特异扩增,那它就会影响到定量结果的可靠性与重复性。要避免这种不利因素,可以通过选择良好的引物并优化反应条件以消除非特异性影响。
天津赛尔生物荧光定量PCR检测mRNA水平 项目 | 样品 | 收费 | 工作日 |
RNA提取 | 少于15个样本: | 140元/个 | 10 |
15-30个样本: | 120元/个 | 15 |
大于30个样本 | 100元/个 | 20 |
RT 逆转率 | | 100元/样本 | 5 |
PCR反应 | | 25元/孔 | 5 |
引物合成每个碱基1.8元,探针标记为1200元/条,如果是用sybr green Ⅰ(染料)做,则免去探针标记的费用,染料赠送。 |
结果提供:
实验详细步骤,和相关数据。
标准曲线,扩增曲线,溶解曲线。
完整的实验报告(含软件分析结果)
客户需知:
请您提供新鲜的且尽量多的材料,或直接提供纯化好的总RNA或DNA(大于5ug/样本)。如是如织:100-200mg 赛尔生物相关服务:
MicroRNA相关服务siRNA干扰课题整体外包服务基因克隆服务慢病毒包装服务腺病毒服务稳定细胞株筛选服务蛋白表达服务抗体制备服务DNA与蛋白相互作用研究噬菌体展示技术服务cDNA文库构建干细胞研究基金申请,标书撰写,专利申请,课题设计等
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