特别提示:包括柱式石蜡包埋组织DNA提取试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床YL及其他非科研用途!
产品名称:柱式石蜡包埋组织DNA提取试剂盒
英文名称:FFPE DNA column extraction kit
产品货号:BTN130934
产品规格:30次
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名称:白细胞裂解液
货号:BTN130989
规格:250mL
本品为即用型白细胞裂解溶液,可以用于裂解分离纯化好的血液白细胞,用于DNA提取、RNA提取等后续实验。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:(以DNA提取为例)
1. 取新鲜抗凝血5mL,在10mL或15mL的塑料离心管中用红细胞裂解液裂解红细胞(红细胞裂解液有几种配方,用户需要根据所选产品的使用手册进行操作,这里不列出每种的详细步骤),也可以直接2500rpm离心5分钟后取白细胞层到一新的10mL或15mL的塑料离心管中。
2.在所得的白细胞沉淀中或所得白细胞层溶液中加自备的生理盐水使得白细胞的终体积为2mL。
3. 加1mL的本产品,混匀后55℃ 保温3小时,其间轻轻振摇数次。
4. 加入3mL自备的Tris饱和酚,轻轻震摇5分钟,使得水相和酚相充分分开。
5. 3500rpm离心15分钟,上层水相含DNA,中间白色层为蛋白质,下层为酚相。
6. 将非常粘稠的含DNA的上清液转移到一干净的10mL或15mL的塑料离心管中。
7. 再用Tris饱和酚重复上面的抽提步骤,直到离心后中间层没有白色的蛋白出现为止。
8.在上清液中加入等体积的自备的lǜ仿,轻轻震摇5分钟,3500rpm离心5分钟,转移上清液到一干净的10mL或15mL的塑料离心管中。此步可以除去残留的酚。
9.在上清液中加入0.1倍体积的自备的3 M 乙酸钠溶液(pH5.2)和2倍体积的无水乙醇,轻柔颠倒混匀,将出现絮状的DNA沉淀。
10. 用移液枪头将DNA沉淀挑取出来,转移到1.5mL的塑料离心管中,用75%的乙醇浸泡2次。此操作可以去除DNA中残留的盐离子。
11.转移DNA沉淀到一个1.5mL的塑料离心管中,空气中放置10分钟左右待乙醇挥发后,加入0.5mL自备的TE缓冲液溶解DNA,4℃放置待用。
名称:柱式毛发DNA提取试剂盒
货号:BTN80805
规格:50次
动物毛发不容易降解,同时含有大量的线粒体,所以是考古研究、法医研究和线粒体研究等领域的重要性实验材料。目前市场上专门用于毛发样品DNA提取的产品很少,为此我们研发了本产品。
产品特点:
1.充分的酶法降解和快速的柱式提取相结合,前者使DNA充分释放,后者使杂质充分被去除。
2.DNA回收率一般在0.5μg/100mg左右(理论产率一般是0.1-1.5μg之间)。
3.DNA纯度高,OD比值一般在1.6-1.8之间。
4.提取的DNA能够用于电泳、酶切、杂交检测和PCR。
5.适合于动物的各种毛发。
试剂盒组成:
成分 | 规格 | 溶液A | 50mL | 蛋白酶K溶液(10mg/ml) | 1mL | 溶液B | 15mL | 溶液C | 50mL | 离心吸附柱(15层膜) | 50套 | 通用洗柱液 | 50mL | DNA洗脱液 | 5mL | 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存(蛋白酶K溶液需要-20℃保存),有效期一年。
使用方法:
1.将30-50mg左右毛发充分剪碎(成芝麻大小就可以),zuì后转移到一个干净的1.5mL塑料离心管中。注意:zuì好从靠近根部的地方剪取样品。
2.加入1mL溶液A(使用之前需取本次实验所需的溶液A现加入自备的β-巯基乙醇,β-巯基乙醇的终浓度为5%)和20μL蛋白酶K溶液(20mg/mL),37℃保温10小时(一般过夜保温就可以)。
注意:zuì好让反应体系处于摇晃状态,此保温长度一般可以让毛发溶化。
3.加入0.3mL的溶液B和0.2mL的自备lǜ仿,振荡器上振荡30秒充分混匀。
4.12000rpm室温离心3分钟,小心将上清转移到新的1.5mL塑料离心管中。
5.在上清液中加入等体积的溶液C,上下颠倒30秒充分混匀。
6.将混合液分两次转移到离心吸附柱中。每次是先将0.7-0.8mL混合液转移到离心吸附柱中,室温放置2分钟,12000rpm室温1分钟,弃穿透液。再把剩余的一半上柱,重复此操作。
7.将0.7mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
8.将0.3mL通用洗柱液加入到离心吸附柱中,12000rpm离心半分钟(此步为第二次洗涤,一般可以省略)。
9.空甩离心吸附柱半分钟去除残留液体。
10.将离心吸附柱放置在一新的1.5mL塑料离心管中,加入30μL通用洗脱液。
11.12000rpm离心1分钟,管底即为毛发DNA溶液,可立即用于PCR,也可长期保存在-20℃。
注意:由于头发中DNA的含量十分少,所以电泳检测时即使全部上样也只能看见十分微弱的DNA条带。
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