Western blot（WB）免疫检测-技术服务

 长沙南科生物技术有限公司是一家专业提供医学、生物学实验技术服务和技术解决方案的生物科技公司，能提供整套实验技术服务，从协商设计实验、代做实验、写作和代发SCI论文到课题完成。
专业提供生物医药实验技术服务
长沙南科生物http://www.nkbio.cn
业务经理陆勇:18229848048/14726920250
技术服务项目:病理形态学、细胞生物学、分子生物学、免疫与生化、组织与基因芯片、动物实验等.
       长沙南科生物技术有限公司是一家专业提供医学、生物学实验技术服务和技术解决方案的生物科技公司，公司拥有完善的病理组织、分子生物、免疫与生化、细胞培养、病毒学、动物及裸鼠实验室，开展质粒构建、蛋白表达、抗体制作、医学及生物实验技术服务，已成功的为湘雅医学院、同济医学院、北京儿童医院、解放军301、309医院、华中农大、上海华山医院、上海瑞金医院、温州医学院、武大医学院、广东医学院、第三军医、第四军医、湖南省人医、湖南省肿瘤医院、湖南农大、湖南中医大、湖北中医大等单位提供了优质的实验技术服务以及相关产品和试剂。

南科生物面对医学院及其附属医院、医药科研院所、设有生物专业高校提供单项和整体课题实验技术服务，对于握有科研课题但工作繁忙而无暇分身的临床医生而言，只需要您将课题交付我们，剩下的工作由南科生物完成，我们可以为您节约大量宝贵的时间和精力；对于面临毕业压力的广大硕博士而言，我们乐于一起探讨课题方案的合理性并给出建议，程度上优化实验方案和节约资金；对于课题也许您还只有一个设想，南科生物只需要您的课题设想或目标，我们愿意和您一起讨论并确定合理的课题方案并付诸实施，直至论文交付和顺利毕业。

南科生物所追求的目标不仅仅是科研课题实施的过程，更多的时候我们关注实施前后的各个环节，客户满意将是南科生物动力。

南科生物力求建立诚信、优质、GX的服务形象，并以此确定南科在医学、生物学实验技术外包领域的领先地位。

南科生物提供组织蜡块包埋、组织切片、HE染色、病理特殊染色、细胞培养、细胞爬片、免疫组织化学IHC，免疫细胞化学ICC、免疫荧光IF、激光共聚焦照相、细胞凋亡TUNEL染色等形态学方面的实验技术服务，包括实验材料提供（组织、细胞、抗体等）、课题设计与实验操作、图片采集与结果评价等方面的技术服务。  南科生物多年以来已建立一批人体各器官正常组织、肿瘤组织与肿瘤旁旁组织的蜡块库和一批常用人、大鼠、小鼠细胞株库存以供选择使用。客户可选择由南科生物提供实验材料或者自己提供材料，我们负责完成组织包埋处理、石蜡切片、细胞培养、细胞爬片、染色、图片采集、数据测定等全套技术服务。

WB免疫检测：
Western blotting (WB)是在蛋白质凝胶电泳和固相免疫测定基础上发展起来的蛋白质检测技术，是将SDS-PAGE电泳分离的蛋白质样本转移到固相载体（硝酸纤维素NC膜，PVDF膜）上，以固相载体上的蛋白质作为抗原，与合适的抗体结合，再与酶标记的二抗结合，经过底物显色或放射自显影对蛋白质进行鉴定及定量的分析技术，其检测蛋白质的灵敏度为ng级，该技术广泛应用于医学、生物学研究领域。
基本步骤：
1.检测样本的准备（新鲜组织、细胞、血清、渗出液等），选择合适的WB抗体（单抗或多抗），实验前请与南科生物联系确认是否有合适的抗体可以提供使用，以避免不必要的重复购买抗体。
2.蛋白质样本制备，根据实验要求选用适当的裂解液，选择制备总蛋白、膜蛋白、浆蛋白或核蛋白，某些特殊的蛋白如线粒体蛋白则需要选用试剂盒进行制备提取，必要时对蛋白进行定量。
3.SDS-PAGE凝胶电泳分离蛋白，并将分离的蛋白转移到NC膜或PVDF膜上。
4.目标蛋白的免疫学检测（一抗和二抗的反应），ECL化学发光法或DAB显色法显示蛋白条带。
5.目的蛋白条带的定量分析，利用软件测定其光密度值IOD，并与内参蛋白条带IOD值进行比较分析，计算目的蛋白相对表达量。

收费:100元/每样本每指标、内参40元每样本。
1）内参抗体由实验室免费提供；
2）客户提供检测样品和抗体（一抗），如要求我方提供则请说明，如我公司有该一抗，使用费300元每指标； 
3）三次重复检测优惠，提供原始胶片。

专业提供生物医药实验技术服务
长沙南科生物http://www.nkbio.cn
业务经理陆勇:18229848048/14726920250
技术服务项目:病理形态学、细胞生物学、分子生物学、免疫与生化、组织与基因芯片、动物实验等

免疫学与生化实验 客户注意事项
1.客户告知实验分组、编号及背景设计资料，有具体要求请事先说明；
2.抗体：事先咨询长沙南科生物，明确抗体种属以及是否有该抗体可使用，如有一抗使用费300元每指标，如无可由双方协商而定，客户自己购买提供或我公司代购；
3.标本收集与保存：
组织样品  新鲜组织放入液氮或-70度保存，组织不少于100mg（约绿豆大小）；
培养细胞  通过细胞计数取不少于2000000个细胞于EP管，加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂，混匀后保存于冰箱（-70℃，避免反复冻融）；
血液细胞标本  以抗凝管保存血样或以淋巴细胞分离液分离细胞后加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂，保存（-70℃可长期保存，避免反复冻融）
血清或细胞培养液标本  离心去掉杂质后取上清入EP管，保存（以上4℃可保存15-20天，-70℃可长期保存，避免反复冻融）
4.样本运输：可选以下任何的一种方式寄送标本
组织样本、细胞样本以干冰运输或加入蛋白保护剂后加冰袋运输；
细胞样本也可以直接快件寄送培养瓶（密封保证不污染，培养液不漏出，细胞不要长得太满，50%左右，灌满培养液）；
血清或上清液直接加冰袋寄送（密封保证液体不漏出，视路途远近2-3天可到达）