对于DNA甲基化的检测，目前采用：甲基化DNA富集并结合高通量测序（MBD-Seq, Methylated DNA Binding Domain-Sequencing）的方法。MBD-Seq的原理是：由于在哺乳动物中甲基化一般发生在CpG的胞嘧啶5位碳原子上，所以可通过特异性结合甲基化DNA的蛋白MBD2b或5’-甲基胞嘧啶抗体富集高甲基化的DNA片段，并结合第二代高通量测序，对富集到的DNA片段进行测序，从而检测全基因组范围内的甲基化位点。
技术路线
生物信息分析
| DSAM-01 | 测序质量评估(QC) |
| DSAM-02 | MBD-Seq序列与参考序列比对 |
| DSAM-03 | MBD-Seq序列比对的甲基化信息概况 |
| DSAM-04 | Peak calling |
| DSAM-05 | Peak在基因上、基因间区的分布情况 |
| DSAM-06 | Peak在基因组区域富集程度统计 |
| DSAM-07 | Peak在基因组区域富集程度统计 |
| DSAM-08 | Peak区域功能注释和富集度分析 |
| 其他 | |
样品要求：
1) 样品质量：OD 260/280值应在1.8～2.0 之间；无RNA污染。无降解（在琼脂糖电泳中，DNA的片段在23kb 的Hind III 酶切的lamda phage DNA的片段之后靠近电源的负极）.
2) 样品浓度：浓度不低于50ng/µl。
3) 样品总量：每个样品总量不少于15µg。
4) 样品溶剂：要溶解在无菌的10 mM TirsHCl， 1mM EDTAE (pH 8.0)溶液中。经过65C 10分钟处理（将可能存在的DNAase 灭活）；
5) 样品运输： DNA低温运输（-20℃）；且在运输过程中请用parafilm将管口密封好，以防出现污染。
特别声明：为了更好的让广大客户放心以及提高本公司自身的服务水平，我们谨慎的作出以下承诺：
1、 在实验不成功的情况下，我们不收取您任何费用；
2、 如果您发现实验结果有任何造假、虚构及有违实验事实的情况，我们将支付实验费用1000%的额外赔偿；
如果您需要此项服务 您可以直接在线下单，我们会在收到后回电并确认订单详情；或者您也可以在线咨询，我们的技术人员会向您介绍我们的具体服务细节；如果您尚未确定是否需要此项服务，或者暂时没有准备好实验材料，欢迎您在有需要时致电我们的RACE专线：400-000-6560
应用案例
非小细胞肺癌（NSCLC）是一个复杂的恶性肿瘤，由于其异质性预后不良的诊断，预后和患者的ZL带来了许多挑战。 DNA甲基化是一个表观遗传调控在正常发育和癌症的重要机制。这是一个非常稳定和特别的模型，因此，是非常适合作为肿瘤表观遗传研究的代表。研究者采用了NSCLC样本和对照组肺组织进行全基因组DNA甲基化分析，结合MethylCap和高通量测序（MBD-seq），以提供全面的肿瘤和对照组肺标本的DNA甲基化图谱。结果通过重亚硫酸氢钠MethylCap序列数据验证。结果表明，重复实验内及实验组和对照组间的MethylCap-Seq数据均显示很强的正相关性
