cDNA文库构建
定义：含一种生物体所有基因编码的cDNA分子的克隆群。以mRNA为模板，经反转录酶催化，在体外反转录成cDNA，与适当的载体（常用噬菌体或质粒载体）连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。
一般实验过程：
1：反转录酶催化合成cDNA链
2：cDNA第二链的合成
3：cDNA的甲基化
4：接头或衔接子的连接
5：Sepharose CL-4B凝胶过滤法分离cDNA
6：cDNA与λ噬菌体臂的连接
注意事项：
1.RNA 的提取（例如异硫氰酸胍法，盐酸胍—有机溶剂法，热酚法等等，提取方法的选择主要根据不同的样品而定）。
2.要构建一个高质量的 cDNA 文库，获得高质量的 mRNA 是至关重要的，所以处理 mRNA 样品时必须仔细小心。
3.由于 RNA 酶存在所有的生物中，并且能抵抗诸如煮沸这样的物理环境，因此建立一个无 RNA 酶的环境对于制备优质 RNA 很重要。
4.文库构建要选择合适的载体，常规用的是 λ 噬菌体，这是因为 λ DNA两端具有由12个核苷酸的粘性末端，可用来构建柯斯质粒，这种质粒能容纳大片段的外源 DNA。
5.胶回收前电泳槽，电泳板，梳子等都要用1%的HCl浸泡过夜。
6.胶回收时电压要稳定。
