简介:miRNA表达检测;茎环引物设计合成;荧光定量PCR;Northern blotting
MicroRNA(miRNA) 是一类长度约19-24nt的非编码单链RNA,通过碱基互补配对的方式与靶基因的3'-UTR区部分或完全互补,剪切靶基因的转录产物或者YZ转录产物的翻译,从而起到转录后调控靶基因表达的作用。miRNA广泛存在于动物、植物、真菌及病毒的基因组中,调控生物体生长发育和疾病发生等过程中相关基因的表达。MiRNA的异常表达可能会导致生理状态的异常和疾病的产生,在多种癌症中,其表达水平会发生明显改变,有可能起到原癌基因和抑癌基因的作用。此外,在许多其他的病变组织和细胞中也检测到了miRNA的异常表达。因此对miRNA的表达的研究具有重要意义。
阅微基因的技术人员通过4年的探索和努力,在miRNA表达检测方面积累了丰富经验,探索出多种有效的实验方法,为您提供全面和优质的miRNA表达检测服务。
服务项目 服务编号 | 内容说明 | 内容说明 |
MIR01 | 实时定量PCR检测 | 反转录和上机检测目标 miRNA 表达差异 |
MIR02 | MiRNA qPCR Array | 以集成在384孔板上的引物与探针组合,荧光定量方法进行miRNA表达谱分析 |
MIR03 | 特定类型疾病 miRNA 表达检测 | 检测肝癌、胃癌、癌等多种肿瘤相关疾病的标志性miRNA |
MIR04 | miRNA 引物设计合成 | 设计并合成用于 miRNA 表达检测的高质量引物 |
技术路线运用成熟的实时定量PCR技术准确、快速地定量检测各种组织、原代细胞及细胞系中目的miRNA的表达情况,具有灵敏度高、实验周期短和特异性高等特点。
miRNA信息表达检测服务
技术特点:
miRNA的结构较为特殊,其长度只有19-24nt,不能够对其用普通引物进行逆转录,阅微基因可采取两种特殊的miRNA逆转录方法:茎环法和加polyA尾法。在成功逆转录后,根据序列特点直接设计相应的通用引物和特异性TaqMan探针,即可对其进行荧光定量。除常规TaqMan探针以外,用户还可选择设计合成TaqMan-MGB探针,其探针设计得更短,特异性更高。
miRNA逆转录方法示意图
A.茎环法B.加A法
收样要求 组织 | >300mg 新鲜动植物样本,≥100mg叶片样本等 |
细胞 | >106个悬浮/贴壁细胞 |
血液 | >1ml全血/全血分离的有核细胞 |
血清 | >1.5ml |
RNA | 总RNA >2μg,体积>20μl,浓度> 200 ng/μl |
您可以得到的数据分析 服务编号 | 结果内容 |
MIR01 | 引物(或探针)及序列,反转录胶图、原始Qrt-PCR数据和实验报告 |
MIR02 | 原始数据和实验报告 |
MIR03 | 原始数据和实验报告 |
MIR04 | 杂交探针序列、探针、目的miRNA及内参U6 snRNA杂交图片及条带灰度扫描结果 |
目的miRNA的扩增曲线(仪器为Thermo Fisher Q6)
目的miRNA的熔解曲线(SYBR Green方法,仪器为Thermo Fisher Q6)