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百奥莱博专业生产供应北京电泳级SYBR Green I价格,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京电泳级SYBR Green I价格
编号:BTN3280
产地:国产|进口
英文名:SYBR GreenⅠ, electrophoretic grade
品Pai:百奥莱博
SYBR Green I,EG是电泳级低毒高灵敏的花青类DNA荧光染料,适用于各种核酸电泳分析。
产品特点:
1.低毒安全,其致突变性低于EB 数倍甚至数十倍。
2. 髙灵敏,SYBR Green I与dsDNA 结合,荧光信号会增强800-1000倍,至少可检出 20 pg DNA,灵敏度高于EB染色法10-25倍。
3.适用范围广,可适用于多种电泳分析,包括琼脂糖凝胶,聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳和毛细管电泳等。与我司的SuperBuffer-2 兼容。
4. 不影响其它修饰酶(Taq酶、逆转录酶、内切酶、T4连接酶等)作用。
5. 操作简单,无须脱色或冲洗。
储存条件:常低温运输,-20℃闭光保存,有效期一年。
使用方法之一:电泳前染色
本方法是在上样时对DNA进行染色,只适于琼脂糖凝胶电泳。
1. 用高纯度的无水DMSO 将10000×的SYBR Green I 稀释100倍成100×电泳前染色液。染色液可以在-20℃和闭光条件下可以保存一个月以上。
2. 按常规方法制备胶,胶的厚度Z好不要超过5mm,胶中不能含任何染料。
3. 将100 X电泳前染色液与DNA样品(包括DNA Marker)按1:10的比例混合,室温放置10-15分钟,加上样液后上样。
4.上样后电泳。
5.在300nm的UV下观察。UV的功率Z好为90W(15W X 6),手持UV一般功率不够,难以得到满意的灵敏度。除300nm外,SYBR Green I还可以在500nm和380nm的激发光下观察(如使用Dark Reader 蓝色可见光透色仪)。也可以用激光扫描仪记录电泳结果。
6. 用配置了520-550nm 滤光片(一般呈黄色或深黄色)的相机拍照。
注意:不要使用与EB 兼容的红色滤光片(能阻挡520-550nm的光)。如果能再加上能滤去UV的滤光片,效果会更好。
7.后续Southern或Northern转膜或胶回收按常规操作进行。
使用方法之二:电泳中染色
本方法是将SYBR Green I 加入到琼脂糖凝胶中,优点是不需要额外的染色处理,只适于琼脂糖凝胶电泳。
1. 将10000×SYBR Green I 直接加入到融化的、但温度已经降低到50℃左右的琼脂糖凝胶中,使其终浓度在0.5-1X左右,混合均匀后倒胶,厚度Z好不要超过5 mm。
2. 按常规方法上样和电泳。
3.电泳后观察和照相处理同方法一。
注意:由于在琼脂糖凝胶中的SYBR Green I在加热融化时会大量分解,所以琼脂糖凝胶Z好需要多少配多少。
使用方法之三:电泳后染色
本方法是在电泳后对DNA进行染色,适用于琼脂糖凝胶电泳和PAGE,检测灵敏度可达20 pg DNA,但该方法需要单独的染色处理。
1. 按照常规方法进行电泳。
2. 用pH7.0-8.3的缓冲液(如:TAE,TBE或TE)将10000×SYBR Green I 稀释10000倍成1×电泳后染色液。
3. 将电泳后染色液倒入合适的聚丙*(代"烯")容器中,放入琼脂糖凝胶,用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色10-30分钟。对聚丙*(代"烯")酰胺凝胶,可取下一块玻璃板,然后将配好的电泳后染色液轻轻地倒在PAGE胶板上,让染色液均匀地覆盖整个PAGE胶板,静置染色30分钟。避免让染色液与玻璃表面接触。
4. 观察和照相处理同方法一。
注意:电泳后染色液可以冷冻避光储存一个星期。反复使用次数取决于胶的大小(胶越大,非特异吸附产生的损耗就越大),一般可重复使用4次。
注意事项:
1. 融化:本产品溶于DMSO中,融化时一定要让其彻底融化,否则SYBRGreen I在液相和固相中浓度不均,影响实验的可重复性。
2. 容器:SYBR Green I 对聚丙*(代"烯")材料的亲和力非特意吸附Z小,故建议在稀释、贮存、染色等使用过程中使用专用的聚丙*(代"烯")类容器,容器表面会被染成橙色。不要使用玻璃和非聚丙*(代"烯")容器。
3. 反复使用:由于凝胶和容器的非特意吸附,使用过的SYBR Green I 再染色时效率会逐渐降低。
4. 稳定性:稀释后的SYBR Green I工作液体Z适保存条件是闭光、密封、低温(4℃)、pH在7.5-8.3。避免将本产品直接加入热的琼脂糖凝胶中,禁止用微波加热处理SYBR Green I。
5. 稀释液:可以用电泳缓冲液稀释SYBR Green I,包括常用的TAE、TBE、TE、SuperBuffer-2等。Z好不要使用水和pH7.8(25℃)的Tris缓冲液。后者的pH在4℃时会升高到8.4。
6.其他影响因素:染色液中Z好不要有SDS,也不要用去污剂洗涤染色用的聚丙*(代"烯")容器时,0.1-.3% SDS 能YZSYBR Green I与DNA 结合。用deaza-G 替代G的DNA 不能有效染色。
疑难解答:
Q:DNA 条带为何出现弯曲或模糊?
A:DNA 过量,将DNA 用量降低到1-5 ng/条带。电泳时间不要超过2小时,否则SYBR Green I 会从DNA上分离出来,会产生弥散状条带。电压不能太高,否则产热会影响SYBR Green I与DNA的结合。
Q:醇/盐沉淀法能否把结合在DNA上的SYBR Green I 去掉?
A:可以。其中乙醇效果Z好,异丙醇次之。但正丁醇、*仿和*酚抽提不能去除与DNA 结合的SYBR Green I。
Q:用SYBR Green I 染过的胶能否用于Southern或Northern Blot?
A:可以,但Z好在预杂交和杂交溶液中加入0.1%-0.3%的SDS。SDS 能是SYBR Green I与DNA 分开。
Q:能否用SYBR Green I染色膜上的DNA。
A:可以用来染色带正电的尼龙膜上的DNA,不能用于中性尼龙膜和硝酸纤维素膜。
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·DNA促旋酶
编号:BTN130651
英文名称:DNA Gyrase(E.coli)
规格:100U
DNA促旋酶(E.coli)是一种II型拓扑异构酶,在ATP存在下向DNA中引入负超螺旋。促旋酶全酶是由两个gyrA亚基(97 kDa)和两个gyrB(90kDa)亚基组成的异源四聚体。本产品主要用于向DNA引入负超螺旋。其反应原理图如下:
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位是指在30μl反应体系中,37℃条件下,30分钟内催化超过95%的0.5μg底物转变为超螺旋质粒所需的酶量。DNA超螺旋化通过不含*化乙啶的琼脂糖凝胶电泳来检测。
热灭火:65℃加热20分钟。
·20%CTAB溶液(DNA级)
编号:BTN101107
英文名称:DNA Gyrase(E.coli)
规格:250mL
DNA促旋酶(E.coli)是一种II型拓扑异构酶,在ATP存在下向DNA中引入负超螺旋。促旋酶全酶是由两个gyrA亚基(97 kDa)和两个gyrB(90kDa)亚基组成的异源四聚体。本产品主要用于向DNA引入负超螺旋。其反应原理图如下:
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位是指在30μl反应体系中,37℃条件下,30分钟内催化超过95%的0.5μg底物转变为超螺旋质粒所需的酶量。DNA超螺旋化通过不含*化乙啶的琼脂糖凝胶电泳来检测。
热灭火:65℃加热20分钟。
·链脲佐菌素溶液
编号:BTN120701
英文名称:Streptozotocin Solution
规格:10mL
本产品浓度为10mg/mL的链脲佐菌素溶液。链脲佐菌素,又称链脲菌素;N-(Methylnitrosocarbamoyl)-α-Dglucosamine;STZ),分子式:C8H15N3O7,分子量:265.22,CAS号:18883-66-4。链脲佐菌素是一种*基葡萄糖-亚,是一种DNA烷基化试剂,能通过GLUT2葡萄糖转运蛋白(GLUT2 glucose trasport protein)独自进入细胞,可以对实验动物能产生糖尿病,用于建立糖尿病模型。STZ需要用柠檬酸和柠檬酸*配制而成的pH4.2缓冲液配制。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期6个月。
北京电泳级SYBR Green I价格关键词:BTN3280,电泳级SYBR Green I,SYBR GreenⅠ, electrophoretic grade
·Orth固定液
编号:BTN140411
英文名称:Orth Fixative Solution
规格:250mL
该固定液固定组织较缓慢,不适合作为临床的活检固定液,4毫米厚的组织固定时间需36-72小时,该液对于染色质的固定好,显示清晰,但可溶解部分红细胞和含铁血黄素。
该固定液不能沉淀蛋白质,它必须和醋酸配成混合固定液。它不能长期固定组织,经它固定的组织应充分水洗后保存于80%酒精中。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
·细胞蛋白质-RNA共提试剂盒
编号:BTN130829
英文名称:Cells total RNA and total protein co-extraction kit
规格:50次
本试剂盒是在同一样品中同时GX快速提取总RNA和总蛋白的试剂盒。本试剂盒的操作过程不用使用*酚、*仿,使用本试剂盒提取的Total RNA和Total Protein可用于siRNA的效果分析、RNA/蛋白质的表达分析等。通常分析经过各种药物处理(或经siRNA Transfection)后的动物培养细胞中的靶mRNA或蛋白质的表达差异时,需要将培养细胞分成2份,或者进行两次培养,一份用于提取Total RNA,另一份用于提取Total Protein,这样实验操作复杂烦琐,实验数据误差较大。本试剂盒可以从同一样品中同时提取Total RNA和蛋白质,方便了实验操作,提高了实验可信度。其实验流程如下:
本试剂盒使用含非离子性表面活性剂的Cell Lysis Buffer裂解细胞,然后使用盐析法将染色体DNA和细胞残渣除去。实验操作只需15分钟,便可以从1×103~1×107个培养细胞中制备含Total RNA和Total Protein的可溶性溶液,此溶液可直接用于蛋白质电泳和Western Blotting分析等。此溶液经Isopropanol沉淀回收Total RNA,再经RNA Preparation Water溶解后的Total RNA溶液可用于Real Time RT-PCR法进行mRNA的表达分析等。
北京电泳级SYBR Green I价格关键词:BTN3280,电泳级SYBR Green I,SYBR GreenⅠ, electrophoretic grade
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BTN100848 ECL法杂交检测试剂盒 ECL DIG Detection Kit
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温馨提示:不可用于临床ZL。