HRM（高分辨率熔解曲线） SNP分型技术服务

 

HRM（高分辨率熔解曲线）SNP分型服务

HRM技术，即高分辨率熔解曲线分析技术 (high resolution melting curve analysis)，是应用高分辨率的荧光染料在饱和浓度下对PCR产物进行熔解曲线分析，通过Tm值和熔解曲线的特征形状，确定SNP基因型，或基因突变。

要使熔解曲线分析能够精确区分一个碱基的微小差异，需要满足以下几个要素：
一是高分辨率荧光染料。与传统的荧光染料不同，高分辨率荧光染料对DNA聚合酶的YZ作用很小，因而可以在饱和浓度下使用。这就解决了传统荧光染料在低浓度使用时由于与双链DNA解离后又在DNA分子别处结合上去，导致熔解曲线峰很宽，分辨率很低的问题。
二是精密荧光PCR仪。要求温度控制精密，步距小，而且反应孔位之间温差很小。
三是熔解曲线处理软件。先进的高分辨率熔解曲线处理软件通过数据转换去伪存真，让单碱基变化造成的熔解曲线的微小变化显示出来。

下图示意A－>C突变的HRM分析结果。杂合子A/C的熔解曲线可以清晰地与纯合子A/A 和C/C分开(左图)。纯合子A/A 和C/C熔解曲线区别很小，通过图形处理，二者的区别也显而易见(右图)。      



要将HRM技术成功用于基因突变检测和SNP分型，除了需要满足以上提到的三个要素外，还需要精心设计引物，尽量拉开不同基因型的熔解曲线区别；优化反应体系，使得体系和不同样本对熔解曲线的影响Z小化。

应用HRM方法分析成百上千个样本的几个SNP位点，具有价格优势。
 

提交数据
分型结果。如需要，可提供所使用方法的原始数据。
 

报告提交周期
收到样品后10-20个工作日。
 
 

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