Western Blot中文一般称为蛋白质印迹。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息
北京 Western Blot技术服务(代做wb实验) 北京冬歌生物支持技术服务
主要实验步骤如下:
1. 蛋白质抽提
2. 蛋白质定量
3. 变性聚丙烯酰胺不连续凝胶电泳(SDS-PAGE)
4. 蛋白质转移到硝酸纤维膜或PVDF膜
5. 膜的封闭和抗体孵育
6. 结果检测
7. 提供实验报告
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Western Blot中文一般称为蛋白质印迹。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息
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免疫印迹服务内容
1、从细胞或特定组织中提取总蛋白质并进行定量分析。
2、电泳:聚丙烯酰胺凝胶分离蛋白样品。
3、转膜(硝酸纤维膜或PVDF膜)。
4、杂交:鉴定膜上的特定蛋白。
5、化学发光显影,灰度分析。
6、多种内参可供选择:Actin,Tubulin,GAPDH。
7、部分一抗免费提供:Bax、Bcl-2、Caspase-3、VEGF
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免疫印迹服务样品要求
1. 如果提供实验材料,实验材料必须保证新鲜,请您采样后立刻放入液氮中速冻或加入样品稳定剂,并用干冰运输。
2. 样本量:
动植物组织:>100mg,
动植物细胞:>5×106个,
酵母细胞或细菌细胞:>10×107l。
3. 质量保证的一抗(可委托我公司代购)。
4. 同时提供相应的材料背景,目的蛋白相关资料,必要的实验设计等。
注意事项:
· a. 应尽量避免引入影响后续定量的杂蛋白(如细胞培养液、蛋白酶YZ剂等)及其他干扰物质;
· b. 样品浓度应适中,1×SDS凝胶加样缓冲液建议用量:贴壁细胞按10cm2培养皿/0.1ml,悬浮细胞按5×106细胞/0.1ml比例加入;
· c. SDS对蛋白质变性和电泳分离至关重要,浓度应控制在2-10%之间,并根据具体需要调整;
· d. 制备好的样品可以在-20℃保存,但时间不宜过长,并避免反复冻融,否则蛋白会发生降解;
· e. 内参对实验结果至关重要,应选择合适的内参。
如有需要欢迎来电咨询 QQ:2507862940 电话: 400-638-1113
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