RACE
一.服务流程
1. 总RNA提取与质检
2. 已知序列的验证
3. 合成5'和3' RACE-ready cDNA链;通过LD-PCR分别进行5' 和3' RACE
4. 基因未知序列验证
二.样本要求
需提供新鲜或者保存完好的细胞(至少5×106)、组织(100mg)、血液(300μl)等样本材料;或纯化好的总RNA(OD260/OD280在1.9-2.1之间,完整性好)或反转录好的cDNA不少于30μl(反转录的总RNA完整性好,纯度在1.9-2.1之间);至少200bp的已知cDNA序列。
三.试验周期
6~8周内完成。如遇总RNA难以抽提的材料或基因表达量较低的样品会与客户协商约定样品试验时间。
四.结果提交
试验完成后公司应向客户提交如下试验结果数据:
1. 试验中用到的所有重要设备的制造厂商、型号、操作参数,以及所有重要试剂的供应商等;
2. 所有试验操作的步骤一份;
3. 各部分的试验结果数据,包括:
RACE试验的凝胶图片和测序报告(测序彩色波形图、序列碱基图);
含未知末端片段的质粒及甘油菌。
注意:
由于不同基因在不同组织中存在时空特异性表达,其基因全长序列也不会完全相同。公司提供的试验结果仅对客户提供样本负责,并提供试验图片佐证测序结果。此外,由于不同基因mRNA可能存在单核苷酸多态性位点或不同的剪接形式,针对这些类型产物的测序结果准确性由客户自行判断。
北京美亿美生物技术有限公司
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