溶瘤腺病毒包装技术服务
百恩维生物(Biowit)的溶瘤腺病毒是以5型腺病毒为基础发展而来,缺失了腺病毒的早期表达基因序列E3区以及E1b基因,而保留了E1a基因。E3基因表达的蛋白能对抗宿主的抗病毒防御系统,E3区的去除能减少宿主的体内免疫反应。E1区是腺病毒复制所必须的,E1区分为E1a、E1b基因。E1a是病毒基因组中个转录的基因,其产物可以与诸如pRb、p107和p130蛋白家族的许多细胞蛋白结合,从而阻止细胞蛋白封闭E2F转录因子,启动DNA复制和细胞周期;E1b基因表达产物能阻止宿主细胞早期死亡,从而允许病毒无障碍复制。在溶瘤腺病毒中保留了E1a基因,而去除了E1b基因,因此保证了该腺病毒能在细胞中能大量的复制。
百恩维的溶瘤腺病毒表达载体中采用广谱性CMV启动子或者肿瘤特异性TERT启动子,ZL基因和E1a基因中间以内部核糖体进入位点序列(IRES)连接,同时在表达载体中引入荧光标记基因,方便感染细胞后的观察。在肿瘤特异性启动子溶瘤腺病毒中,目的基因和E1a基因在肿瘤细胞中特异性表达,导致细胞溶胀而摧毁肿瘤细胞,但无法在正常机体细胞内复制而不具有杀伤作用,因此具有更高的抗肿瘤效应和更低的副作用。是目前腺病毒基因ZL的一个主要研究方向。
溶瘤腺病毒表达载体图谱如下: