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北京现货Alexa Fluor 488标记驴抗小鼠IgG(H+L)优惠价是高品质的二抗产品,由北京百奥莱博供应,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多Alexa Fluor 488标记驴抗小鼠IgG(H+L)等二抗产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:北京现货Alexa Fluor 488标记驴抗小鼠IgG(H+L)优惠价
编号:SY0721
品Pai:百奥莱博
规格:100μl
本品是由Alexa Fluor 488标记的驴抗小鼠IgG(H+L),使用抗原偶联的琼脂糖微珠从驴抗血清内亲和色谱纯化所得。免疫电泳和/或ELISA法检测显示本品特异性结合完整的小鼠IgG分子,也会与其他小鼠免疫球蛋白的轻链结合。本品不会识别非免疫球蛋白类的血清蛋白,但可能会与其他物种免疫球蛋白发生交叉反应。
Alexa Fluor 488的光谱性质同FITC,Amax(激发波长)为493nm,Emax(发射波长)为519nm。本品适合做多标实验,广泛应用于多种免疫学实验如免疫细胞化学(ICC),流式细胞术(FC)以及免疫组化(IHC)等。
浓度:0.75 mg/ml
缓冲液:0.005M 磷酸*,0.125M *化*, pH 7.6
稳定剂:7.5mg/ml BSA(无IgG,蛋白酶),50% 甘油
防腐剂:0.025% 叠氮化*
推荐稀释比例:1:50~400(适合多数实验)
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期一年。
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·4×Tris-HCl分离胶缓冲液,pH8.8
编号:SY0355
英文名称:4×Tris-HCl Separating Gel Buffer, pH8.8
规格:250ml
4×Tris-HCl分离胶缓冲液中含有1.5M Tris base,用HCl调节pH8.8,25 ℃。可用于SDS-PAGE或native PAGE下层胶的配制,本产品不含SDS,如配制SDS-PAGE,需另外添加10%SDS(SY0352),或购买4×Tris-HCl-SDS分离胶缓冲液(SY0354)。
Tris英文名称:Tris base;2-Amino-2-(hydroxymethyl)-1,3-propanediol
分子式:C4H11NO3
分子量:121.14。
储存条件:室温。
·双链DNA定量检测试剂盒
编号:SY0260
英文名称:Picogreen dsDNA Assay Kit
规格:2000T
Picogreen是一种极为灵敏的荧光核酸染料,常用于双链DNA的定量检测。历来DNA浓度的测定在cDNA文库的构建,DNA亚克隆、PCR产物的估测等领域中具有重要意义,疫苗等生物制品中残留微量DNA的检测更是直接关系到人类的健康。
常用的检测核酸的方法有:1)紫外吸光法(A260),该法操作简便,但DNA样品中核苷酸、单链DNA、RNA和蛋白质对紫外吸收信号影响很大,还容易受到核酸样品中污染物的干扰,不能区分DNA和RNA,而且灵敏度低(ΔA260=0.1相当于5ug/ml的dsDNA);2)探针杂交法,该法是传统检测微量DNA的常用方法,基本能满足目前疫苗和ZL性生物制品的检测需求,但是该法耗时较长,操作繁琐,稳定性、敏感性和特异性较差;3)Hoechst33258染料法,Hoechst33258是一种一定程度上特异于双链DNA的核酸染料,基本不受蛋白质等污染物的干扰,可以检测低至10ng/ml的DNA;在检测稳定性和灵敏度上仍达不到理想效果。
Picogreen dsDNA定量法:Picogreen仅在与DNA双链结合后才发出荧光,且所产生的荧光与DNA浓度呈正比,在存在ssDNA、RNA和单体核苷酸的条件下,可以选择性地检测低至25pg/ml的dsDNA。该分析在三个数量级范围内呈线性,且几乎无序列依赖性,可以精确地测量多个来源的DNA,包括基因组DNA、病毒DNA、小量提取DNA或PCR扩增产物。
相比传统的方法,Picogreen dsDNA Quantitation Reagent定量具有以下优势:
①灵敏度高:数量级较UV吸光读数更敏感,可节省宝贵的样品;
②特异性强:在等摩尔的RNA存在的条件下,对dsDNA具有特异性;
③耐受性好:耐受较高浓度的盐、尿素、乙醇、*仿、去垢剂、蛋白或琼脂糖,可以直接定量PCR扩增产物而无需从反应混合物中纯化DNA。
④易于使用——只需在样品中加入染料,等待5分钟,然后读数即可,且适用于96和384孔板;与大多数基于荧光的酶标仪和荧光计兼容。
⑤适用范围广:可适用于PCR的分析、芯片样品、DNA损伤分析、酶活性分析、基因组DNA定量以及复杂混合物中dsDNA的检测和病毒DNA定量等多种领域。
若每次分析体积为2 mL,本试剂盒各组分试剂足够200次分析使用,若使用微孔板或96孔板检测,每次使用量200µl,则各组分试剂足够2000次分析。
产品组份:
组分名称 | 产品编号/规格 | 保存 |
dsDNA Quantitation Reagent | 100µl×10 | 2~6℃避光干燥 |
2×TE buffer | 50ml | 2~6℃(短期)或-20℃(长期) |
Calf thymus DNA standard (100µg/ml) | 1ml | 2~6℃(短期)或-20℃(长期) |
注意事项
1)Picogreen定量试剂含有DMSO(已知有毒试剂),请小心操作;
2)尽管目前尚未有数据表明Picogreen具有诱变性和毒性,但是该试剂能结合双链DNA,请操作时务必小心。
试剂准备
1)1×TE buffer 的配制:将2×TE 用无菌去离子水(不含Dnase)等体积稀释至1×工作液。
2)PicoGreen工作液的配制:使用前将PicoGreen dsDNA定量试剂回温至室温;PicoGreen是以100µL 200×的浓缩液形式保存于无水DMSO中的(共10管)。实验当天,根据实验需求用1×TE按1:200 的比例稀释适量定量试剂浓缩液。例如要准备足够的操作溶液以2ml检测体系测定20个样品,可向19.9mL1×TE 中加入100μL PicoGreen dsDNA 定量试剂。
【注】:
a、由于试剂容易吸附到玻璃表面,要在塑料容器中配制。
b、PicoGreen 试剂见光易降解,所以应将配好的溶液用铝箔包住或放置暗处避光保存。
c、溶液Z好在配制好数小时内使用,以保证结果。
检测步骤
1、 2µg/ml的Calf thymus DNA standard浓缩液的配制
用1×TE对Calf thymus DNA standard (100µg/ml)进行50倍稀释,即向30µl Calf thymus DNA standard加入1.47ml 1×TE混匀即可。
2、 标准曲线的制备
① 比色皿体系检测---(2ml)
a、按照表1 向一次性微量比色皿中加入TE和2µg/ml Calf thymus DNA standard,随后加入1ml PicoGreen定量试剂,混匀后,于室温避光孵育2-5min,并以1×TE缓冲液为blank。
【注】:确信不要在样品中引入气泡,轻轻地弹微量检测皿的外部,可以驱散气泡。
TE (µl) | 2µg/ml Calf thymus DNA standard (µl) | 稀释的PicoGreen定量试剂(µl) | Calf thymus DNA standard终浓度 |
0 | 1000 | 1000 | 1µg/ml |
900 | 100 | 1000 | 100ng/ml |
990 | 10 | 1000 | 10ng/ml |
999 | 1 | 1000 | 1ng/ml |
1000 | 0 | 1000 | blank |
表1 比色皿体系所需加入各组分量及标准品终浓度表
b、于荧光仪中检测各浓度荧光值,Ex/Em=480nm/520nm。
【注】:为了确保荧光读数在荧光仪的检测范围内,应调节增益使含DNA浓度的样品荧光值与荧光仪的值一致;为了减少光漂白,应保持所有样品的检测时间一致。
c、各浓度得到的荧光值减去空白对照荧光值,对DNA浓度和荧光值做标准曲线。
② 微孔板体系检测(200µl)
a、按照表2 向96孔板中加入TE和2µg/ml Calf thymus DNA standard,随后加入100µl PicoGreen定量试剂,混匀后,于室温避光孵育2-5min,并以1×TE缓冲液为blank。【注】:确信不要在样品中引入气泡,轻轻地弹微量检测皿的外部,可以驱散气泡。
TE (µl) | 2µg/ml Calf thymus DNA standard (µl) | 稀释的PicoGreen定量试剂(µl) | Calf thymus DNA standard终浓度 |
0 | 100 | 100 | 1µg/ml |
90 | 10 | 100 | 100ng/ml |
99 | 1 | 100 | 10ng/ml |
99.9 | 0.1 | 100 | 1ng/ml |
100 | 0 | 100 | blank |
表1 酶标板体系所需加入各组分量及标准品终浓度表
b、于荧光酶标仪中检测各浓度荧光值,Ex/Em=480nm/520nm。
【注】:为了确保荧光读数在荧光仪的检测范围内,应调节增益使含DNA浓度的样品荧光值与荧光仪的值一致;为了减少光漂白,应保持所有样品的检测时间一致。
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·AP-1-GFP报告基因质粒
编号:SY0187
英文名称:AP-1 GFP Reporter Plasmid
规格:1μg
AP-1-GFP报告基因是用于检测AP-1转录活性水平为目的的报告基因。AP-1(activating protein-1)是一类核转录因子参与转化、分化、凋亡等多种生物学功能。
AP-1-GFP报告基因主要应用于细胞中MAPK/JNK信号通路、药物研究、基因过表达和RNAi的表型分析等。
pGMAP-1-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个AP-1结合位点,可以GX地检测AP-1的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因,更便于后续的检测。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。另外,由于质粒体积减小,使得AP-1-GFP报告基因更易于转染。
质粒图谱

pGM AP-1 -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’
使用说明
pGMAP-1-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。
注意事项
1)本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
储存条件:-20℃。
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·谷胱甘肽高速纯化树脂(用于GST标签蛋白纯化)
编号:SY0396
英文名称:Glutathione Agarose Resin 4FF
规格:10ml
本品是一种GST标签蛋白纯化树脂,结构上是以高度交联的4%琼脂糖凝胶为基质,通过12个原子的间隔臂,用化学方法共价结合还原型谷胱甘肽制作而成,具有更高的物理化学特性,可以耐受更高的压力,在相对较高的流速下,实现对目的蛋白的纯化,更适于工业大规模蛋白的纯化。
此外,本品特异性好,性价比高,可以一步纯化各种表达系统中谷胱甘肽-S-转移酶、谷胱甘肽依赖性蛋白和谷胱甘肽重组衍生物。
基质(Matrix):高度交联的4%琼脂糖微球
配体(Ligand):通过12原子间隔臂偶联的谷胱甘肽
孔径(Bead size):45-165µm
载量(Capacity):>10mg GST protein/ml 基质(40kDa)
压力(PressureMax):0.3 MPa, 3bar
pH稳定范围:3-12
储存缓冲液:20%乙醇
储存条件:4℃,有效期2年
·XL10-Gold化学感受态细胞
编号:SY0018
英文名称:XL10-Gold Chemically Competent Cell
规格:100μl×10管
XL10-Gold化学感受态细胞是经特殊工艺处理得到的感受态细胞,特别适合于大分子量DNA的GX转化。具有四环素和*霉素抗性,使用Puc19质粒测得其转化效率达108cfu/μg,
本品基因型:TetrΔ(mcrA)183Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac Hte [F´proAB lacIqZΔM15 Tn10 (Tetr) Amy Camr]。
主要具有如下特点:
① Hte表型可增强较大分子量质粒和连接产物的GX转化;
② 具有限制性内切酶缺陷性,更利于克隆 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取;
③ 更适于质粒文库的构建;
④ 具有lacIqZΔM15,可用于蓝、白斑筛选。
注意事项
1)感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。
2)整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。
3)为确保转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温,且每次转化感受态使用量,不低于100μl。
4)为防止转化不成功,可以保留部分连接反应液,以重新转化,化实验可能遇到的风险。
使用方法
1)取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。
2)向100μl感受态细胞悬液中加入0.1-50ng(<10μl /100μl感受态)目的DNA或2μl连接产物,轻轻旋转离心管以混匀内容物,在冰浴中静置30min。
3)置于42℃水浴中热激30s,然后快速将管转移到冰浴中,冷却2-3min,该过程不要摇动离心管,否则会降低转化效率。
4)向离心管中加入900μl 42℃预热的无菌NZY+培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床振荡培养1h(225-250rpm),目的是促使菌体复苏。
【注】:此步也可用LB培养基(不含抗生素)进行菌体复苏。
5)取上述≤200μl转化产物涂至含有相应抗生素的LB固体平板上,将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
【注】:如需做蓝白斑筛选,需至少孵育17h,以充分显色。
储存条件:-80℃
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