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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京蛋白质Ladder(10-200kD)价格厂家,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京蛋白质Ladder(10-200kD)价格厂家
品Pai:百奥莱博
编号:YT628
英文名:Protein Ladder (10-200kD)
规格:100μl
产地:国产|进口
本蛋白Ladder是一种包含了从10kD到200kD共14种高度纯化的重组蛋白的非预染蛋白质分子量标准。这些蛋白在经SDS-PAGE电泳和考马斯亮蓝染色后,可形成非常清晰的蛋白条带,其中50kD条带染色Z深,为快速判断蛋白条带的分子量提供了便利(参考下图)。本Protein Ladder共提供了从10kD到200kD共14条蛋白条带(10kD,15kD,20kD,25kD,30kD,40kD,50kD,60kD,70kD,85kD,100kD,120kD,150kD,200kD),条带较密,分子量条带范围较宽,更适合分子量的比对。并且重组产生的蛋白条带的分子量都是整数分子量,使分子量的比对更加方便。本品已配制在1X SDS-PAGE上样缓冲液中,可以直接使用,无需煮沸。根据上样孔的大小,本Protein Ladder通常每次上样5-10微升。
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注意事项:
1. 本Protein Ladder (10-200kD)不可在100℃加热或煮沸,可加热到37-40℃数分钟以便溶解。
2. 本Protein Ladder (10-200kD)用1X SDS-PAGE上样缓冲液配制,不适用于非变性PAGE胶。
3. 在使用8-10%或更低浓度的凝胶时,低分子量的蛋白可能会电泳至*酚蓝的前面,甚至电泳出凝胶,导致染色时观察不到相应的蛋白条带。
4. Western实验时,建议使用百奥莱博的彩色预染蛋白分子量标准(YT621/YT622),以便更好地观察转膜效果。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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·T4多聚核苷酸激酶(T4 PNK)
编号:YT513
英文名称:T4 Polynucleotide Kinase
规格:100U|500U
本酶是一种多聚核苷酸5"羟基激酶,可以催化ATP的γ位磷酸基团向单链或双链DNA、RNA、寡核苷酸或带有3"磷酸基团的单核苷酸的5"羟基转移。其他NTP也可产生相同的反应:5"-OH + NTP → 5"-P + NDP。
上述的磷酸化反应是可逆的。当缺失ATP并且存在ADP的情况下,T4 Polynucleotide Kinase可以显示出5"磷酸酯酶的活性,催化单链或双链DNA、RNA、寡核苷酸或带有3"磷酸基团的单核苷酸的5"磷酸基团向ADP的转移形成ATP。其他NTP也可产生相同的反应:5"-P + NDP → 5"-OH + NTP(Z适pH为6.4左右)。
当ATP和ADP都适量存在时,T4 Polynucleotide Kinase可以催化单链或双链DNA、RNA、寡核苷酸或带有3"磷酸基团的单核苷酸的5"磷酸基团和ATP的γ位磷酸基团之间的交换反应。其他NTP也可产生相同的反应:5"-P + NTP + NDP→5"-P + NDP + NTP。T4 Polynucleotide Kinase同时具有3"磷酸酯酶活性,可催化3"磷酸化的多聚核苷酸的去磷酸化:3"-P → 3"-OH + Pi(Z适pH为5.9左右)。T4 Polynucleotide Kinase的激酶活性在C-末端附近,而磷酸酯酶活性在N-末端附近。
产品组份:
T4 Polynucleotide Kinase(10U/μl) ——————100U
Reaction Buffer A(10X)————————————80μl
Reaction Buffer B(10X)————————————40μl
24% PEG Solution———————————————40μl
用途:寡核苷酸、DNA或RNA的5"末端标记,用作Southern、Northern、EMSA等的探针,凝胶电泳的marker,DNA测序引物,PCR引物等;使寡核苷酸、DNA或RNA的5"端磷酸化,确保后续连接反应顺利进行;催化3"磷酸化的单核苷酸的5"磷酸化,使该单核苷酸可以和DNA或RNA的3"末端连接;去除3"端磷酸基团。
来源:由大肠杆菌表达,表达基因的来源为T4嗜菌体。
活性定义:37℃30分钟内,将转移ATP上1 nmol γ-磷酸基团转移到DNA 5"-OH末端所需的酶量定义为1个活性单位。
酶活性检测条件:100mM Tris-HCl(pH8.0),10mM MgCl2,5mM DTT,0.5mM 5"-OH DNA,0.05mM ATP,0.1MBq/ml [γ-33P]-ATP。
纯度:不含DNA内切酶和外切酶,不含RNA酶。
酶储存溶液:20mM Tris-HCl(pH7.5),25mM KCl,0.1mM EDTA,2mM DTT,50% glycerol。
Reaction Buffer A(10X)(用于磷酸化反应):500mM Tris-HCl(pH7.6 at 25℃),100mM MgCl2,50mM DTT,1mM spermidine,1mM EDTA。
Reaction Buffer B(10X)(用于交换反应):500mM imidazole-HCl(pH6.4 at 25℃),0.18M MgCl2,50mM DTT,1mM spermidine,1mM EDTA,1mM ADP。
失活或YZ:75℃加热10分钟可使T4 Polynucleotide Kinase失活,加入EDTA也可使T4 Polynucleotide Kinase失活。金属离子螯合剂、磷酸盐、铵根离子、大于50mM的KCl和NaCl均可显著YZT4 Polynucleotide Kinase的活性。
储存条件:-20℃。
注意事项:
1. 铵盐沉淀获得的DNA不能用于T4 Polynucleotide Kinase的标记反应。铵盐可强烈YZT4 Polynucleotide Kinase的酶活性。
2. PEG可促进磷酸化反应速率和效率;交换反应体系应加入PEG。
使用说明:
1. DNA 5" 末端标记:
a. 参考如下表格设置反应体系:
待磷酸化DNA—————————————————1~20pmol (5" 末端)
Reaction Buffer A (10X)———————————2µl
[γ-32P or γ-33P]-ATP (3,000Ci/mmol)————20pmol
补充无核酸酶的去离子水 ———————————至19µl
T4 Polynucleotide Kinase (10U/µl)——————1µl
b. 按上表设置好反应体系后,轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在速度轻轻混匀),随后离心沉淀液体。
c. 37℃孵育30分钟。
d. 加入1µl 0.5M EDTA (pH8.0)混匀,以终止反应。
e. 后续可以使用酚*仿抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的DNA,也可以使用适当的DNA纯化试剂盒进行纯化。DNA纯化试剂盒(YT009)可以向百奥莱博订购。
2. DNA 5’ 末端磷酸化:
a. 参考如下表格设置反应体系:
待磷酸化DNA————————————————1~20pmol (5" 末端)
Reaction Buffer A (10X)——————————2µl
0.1mM ATP—————————————————1µl
补充无核酸酶的去离子水 ——————————至19µl
T4 Polynucleotide Kinase (10U/µl)—————1µl
b. 按上表设置好反应体系后,轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在速度轻轻混匀),随后离心沉淀液体。
c. 37℃孵育30分钟。
d. 加入1µl 0.5M EDTA (pH8.0)混匀,以终止反应。
e. 后续可以使用酚*仿抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的DNA,也可以使用适当的DNA纯化试剂盒进行纯化。DNA纯化试剂盒(YT009)可以向百奥莱博订购。
3. 通过交换反应(exchange reaction)进行DNA 5" 末端标记:
a. 参考如下表格设置反应体系:
待磷酸化DNA——————————————————1~20pmol (5" 末端)
Reaction Buffer B (10X)————————————2µl
[γ-32P or γ-33P]-ATP (3,000Ci/mmol)—————40pmol
24% PEG Solution ———————————————4µl
补充无核酸酶的去离子水 ————————————至19µl
T4 Polynucleotide Kinase (10U/µl)———————1µl
b. 按上表设置好反应体系后,轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在速度轻轻混匀),随后离心沉淀液体。
c. 37℃孵育30分钟。
d. 加入1µl 0.5M EDTA (pH8.0)混匀,以终止反应。
e. 后续可以使用酚*仿抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的DNA,也可以使用适当的DNA纯化试剂盒进行纯化。DNA纯化试剂盒(YT009)可以向百奥莱博订购。
4. 其它用途可以参考上述用途或相关文献资料进行。
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·Aurora AYZ剂(PHA-739358)(达努塞替)
编号:YT938
英文名称:Danusertib
规格:10mM×0.2ml|5mg|25mg
本品是一种Aurora kinaseYZ剂,作用于Aurora A/B/C,无细胞试验中IC50为13nM/79nM/61nM,适度有效作用于Abl、TrkA、c-RET和FGFR1,对Lck、VEGFR2/3、c-Kit、CDK2等作用效果稍弱。
CAS:827318-97-8
分子式:C26H30N6O
分子量:474.55
纯度:99%
结构式:
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Danusertib也YZ其他激酶活性,比如作用于FGFR1,Abl,Ret 和Trka时IC50分别为47,25,31和31nM。Danusertib处理野生型MEFs和p53缺陷型MEFs后,野生型细胞在有丝分裂(4N)时遭到YZ,停滞48小时,而p53缺陷型细胞在DNA为4N时不被YZ,持续有丝分裂,DNA变为>8N。Danusertib处理导致p53蛋白水平的上升,也引起p21蛋白增多,p53在转录水平上调节p21蛋白。
储存条件:-20℃,有效期12个月。
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BTN130643 烷基腺嘌呤DNA糖基化酶 AAG(Alkyladenine DNA Glycosylase)
CYB167056 兔抗马IgG
PY02-370 M17琼脂 100克
松三糖 Chromeazurol S 207511-10-2或10030-67-8
B0501 马血清(辐照灭菌)
25316-40-9 Doxorubicin hydrochloride 盐*(代"酸")阿霉素
维生素B6 L(+)Arabinose 58-56-0
ARB10445 人甲胎蛋白(AFP)含量检测 Human alpha-fetoprotein,afp ELISA KIT
矿物油 Potassium citrate monohydrate 8042-47-5
苏丹Ⅳ染色液 3×50ml
BL1313 2×Taq Plus PCR MasterMix(不含染料)
ARB13381 牛淀粉酶(AmylAse)Elisa分析
癸基吡喃葡萄糖苷 L-Alanine 58846-77-8
606-68-8 NADH Na2 还原型辅酶Ⅰ二*
ARB12333 大鼠卵泡抑素(FS)elisa检测操作说明书 Rat follistatin,fs ELISA KIT
50-69-1 D-Ribose D-核糖
胞嘧啶 Oil red O 71-30-7
ARB10813 人抗网硬蛋白抗体(ARA)ELISA代测服务 Human anti-gastric parietal cell antibody,agpa/pca ELISA KIT
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温馨提示:不可用于临床ZL。