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RFT161型BSA溶液(PCR级)价格厂家的品Pai:百奥莱博,是优质的核酸扩增(PCR)产品,用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多BSA溶液(PCR级)等核酸扩增(PCR)产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:RFT161型BSA溶液(PCR级)价格厂家
编号:RFT161
产地:国产|进口
英文名:BSA Solution(PCR Grade)
品Pai:百奥莱博
规格:5×1ml
PCR反应体系中常添加BSA,它能降低模板贴附管壁的数量,使得有更多的模板参与扩增。另外,BSA能降低引物二聚体的形成。在扩增含有黑色素等PCRYZ剂的古DNA或模版时,BSA具有一定的促进作用。PCR反应中BSA终浓度在0.01μg/μl~0.1 μg/μl。
使用方法:
1、-20℃保存的BSA溶液常温融化,混匀。
2、根据根据PCR反应体系,加入适量体积的BSA。
| 20μl 体系 | 反应体系终浓度 |
10×PCR Buffer | 2μl | 1× |
BSA(10mg/ml)* | 0.02-0.2μl | 0.1-0.01 μg/μl |
模板 | 0.05-0.5μg | as you wish |
上游引物 10μM | 0.5μl | 0.2μM |
下游引物 10μM | 0.5μl | 0.2μM |
dNTP10mM | 0.5μl | 200μM |
Taq | 0.5-1μl | 2.5-5 U |
灭菌水 | up to 20μl | |
注:不同模板,不同片段的扩增可能需要不同浓度的BSA,可以适当调节BSA加入体积,找到适合自己反应的BSA浓度。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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RFT161型BSA溶液(PCR级)价格厂家关键词:BSA溶液(PCR级),BSA Solution(PCR Grade),RFT161
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·GST标签抗体
编号:RFT171
英文名称:Mouse anti-GST Monoclonal antibody
规格:20μl
小鼠抗GST单抗克隆IgG,抗体推荐用于重组蛋白GST标签检测,不管GST 位于重组蛋白N 端或者C 端。本品采用蛋白A纯化自小鼠腹水,浓度为1mg/ml,
推荐应用比例(稀释比例依不同实验具体情况而定):
Western Blot————1:3000~1:50000
ELISA-———————1:5000~1:200000
储存条件:-20℃
·2×ligation solution MasterMix
编号:RFT108
英文名称:Mouse anti-GST Monoclonal antibody
规格:150μl
2×ligation solution MasterMix是含有T4 DNA Ligase,ligation buffer的2×MasterMix,实验时,只需加入片段和载体即可进行连接反应。适用于DNA片段和载体DNA的连接以及DNA片段和Linker或Adaptor DNA的连接。按照10μl连接体系计算,每次使用5μl,可以使用30次。
注意事项
1、2×ligation solution MasterMix由于含有T4 DNA ligase,使用前冰浴中彻底融化,混匀后使用。
2、为了提高转化效率,转化时建议所加入连接产物的量不要超过感受态细胞体积的10%。
使用方法:一、DNA片段和载体DNA的连接
(1)粘性末端的连接
1.反应体系:
| 10μl体系 | 终浓度 |
线性载体DNA | xμl | 10-50 ng |
插入DNA片段 | yμl | 插入片段:载体=1:1-5:1* |
2×ligation solution MasterMix | 5μl | 1× |
ddH2O | up to 10μl | |
注意:载体与插入片段的摩尔数比需要优化:一般vector:insert在1:1~1:5之间均可得到较好的结果。用以下公式计算片段摩尔数:pmol数= DNA量(ng)/(660×片段bp数)×1000。例如:插入片段2000bp,线性载体为3000bp,如果载体使用量为50ng(0.025pmol),10μl连接体系中vector:insert的摩尔比是1:3,则需要2000bp pmol数为0.075pmol,插入片段2000bp的使用量为100ng。
2、彻底轻柔混匀后,瞬间离心,将管壁上的溶液收集到管底。
3、反应条件:16℃孵育30分钟。
4、可取5μl连接产物热击转化50μl感受态细胞或取1-2μl连接产物电击转化50μl感受态细胞。
注意:a.若要提高电转实验效率,推荐65℃孵育10分钟或70℃孵育5分钟以灭活T4 DNA Ligase后,用DNA产物纯化试剂盒或*仿抽提对连接后的DNA片段进行纯化后进行电击转化。
b.若要提高转化子数目,可将连接时间延长至1小时。
(2)平末端的连接
1、反应体系:
| 10μl体系 | 终浓度 |
线性平末端载体DNA* | xμl | 10-50 ng |
插入DNA片段 | yμl | 插入片段:载体=1:1-5:1** |
2×ligation solution MasterMix | 5μl | 1× |
ddH2O | up to 10μl | |
注意:a.平滑末端的载体与 DNA 片段进行连接时,应首先将载体进行去磷酸化处理,以防止其自身环化。
b.载体与插入片段的摩尔数比需要优化:一般vector:insert在1:1~1:5之间均可得到较好的结果。用以下公式计算片段摩尔数:pmol数= DNA量(ng)/(660×片段bp数)×1000。例如:插入片段2000bp,线性载体为3000bp,如果载体使用量为50ng(0.025pmol),10μl连接体系中vector:insert的摩尔比是1:3,则需要2000bp pmol数为0.075pmol,插入片段2000bp的使用量为100ng。
2、彻底轻柔混匀后,瞬间离心,将管壁上的溶液收集到管底。
3、反应条件:16℃孵育30分钟。
4、可取5μl连接产物热击转化50μl感受态细胞或取1-2μl连接产物电击转化50μl感受态细胞。
注意:a.若要提高电转实验效率,推荐65℃孵育10分钟或70℃孵育5分钟以灭活T4 DNA Ligase后,用DNA产物纯化试剂盒或*仿抽提对连接后的DNA片段进行纯化后才能进行电击转化。
b.若要提高转化子数目,可将连接时间延长至1小时。
二、线性DNA的自身环化
1、反应体系:
| 10μl体系 | 终浓度 |
线性载体DNA | xμl | 10-50 ng |
2×ligation solution MasterMix | 5μl | 1× |
ddH2O | up to 10μl | |
2、彻底轻柔混匀后,瞬间离心,将管壁上的溶液收集到管底。
3、反应条件:16℃孵育30分钟。
4、可取5μl连接产物热击转化50μl感受态细胞或取1-2μl连接产物电击转化50μl感受态细胞。
注意:若要提高电转实验效率,推荐65℃孵育10分钟或70℃孵育5分钟灭活T4 DNA Ligase后,用DNA产物纯化试剂盒或*仿抽提对连接后的DNA片段进行纯化后才能进行电击转化。
三、接头连接
1、反应体系:
| 10μl体系 | 终浓度 |
线性DNA | xμl | 100-300 ng |
磷酸化接头 | yμl | 0.5-1 μg |
2×ligation solution MasterMix | 5μl | 1× |
ddH2O | up to 10μl | |
2、彻底轻柔混匀后,瞬间离心,将管壁上的溶液收集到管底。
3、反应条件:16℃孵育30分钟。
4、65℃孵育10分钟或70℃孵育5分钟灭活T4 DNA Ligase。连接产物可以直接进行限制性内切酶酶切反应。
储存条件:-20℃
RFT161型BSA溶液(PCR级)价格厂家关键词:BSA溶液(PCR级),BSA Solution(PCR Grade),RFT161
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·考马斯亮蓝快速染色液
编号:RFT054
英文名称:Commassie Blue Fast Staining Solution
规格:500ml
本考马斯亮蓝快速染色液是以考马斯亮蓝G-250为主要成分,采用新配方配置而成。可用于SDS-PAGE或非变性PAGE胶(native gel)的快速染色。由于配方中不含甲醇、乙酸等物质,因此在整个染色过程中清洁、安全,并且用水即可脱色。整个染色脱色过程只需30分钟左右即可得到清晰可见的结果,灵敏度高,可见10ng蛋白带。
用前必读:
1、使用前如发现瓶中有少许沉淀,请混匀后使用。
2、以下“使用方法”是针对0.75mm厚度,10×10cm凝胶染色程序。
使用方法:1、漂洗:
将电泳后的PAGE胶取下放入微波炉专用塑料容器中,加入适量超纯水(以刚刚覆盖过胶面为适),微波炉中高火(700-800瓦)加热,至溶液沸腾后继续煮沸1-2分钟;取出容器均匀摇动数下;重复上述步骤2-3次;弃尽水溶液。
2、染色:
加入适量染色液(用量根据凝胶面积的大小及容器大小而定,以浸没胶面为准),放入微波炉中高火(700-800瓦)加热,溶液沸腾后继续煮沸1-2分钟;取出容器均匀摇动数下;重复上述步骤数次,直至蛋白条带清晰可见时即可停止加热;弃去染色液(收集到备用容器中,可以反复利用1-2次)。
注:
a.此步骤是染色的关键步骤,染色停止的标准是-条带清晰可见。如由于挥发导致染色液减少,可适当补加染色液。
b.如使用1.0mm或更厚的凝胶,染色煮沸时间会相应延长。
3、脱色:
加入适量超纯水(以刚刚覆盖过胶面为适),放入微波炉中高火(700-800瓦)加热,至溶液沸腾后继续煮沸1-2分钟;取出容器均匀摇动数下;重复上述步骤1-2次,此时PAGE胶的蓝色背景应已去除。
4、保存:
弃去水溶液,加入适量超纯水,观察和保存染色结果。
注意事项:1、使用方法中的各种参数仅针对面积8×10cm或10×10cm,厚度0.75mm的凝胶,如果使用更大面积或更厚的凝胶,请加入更多的染色液并延长各步骤的时间。
2、对于SDS-PAGE胶,步骤1的漂洗非常重要,因为残余的SDS会严重影响后续的染色;而对于不含SDS的非变性胶的染色,可以省略步骤1。
3、本染色液可以重复利用1-2次,敏感性没有明显下降。
4、本染色液有轻微腐蚀性,请带手套操作。
储存条件:室温,有效期2年。
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温馨提示:不可用于临床ZL。