抗性筛选型Cas9载体

尽管CRISPR-Cas9 敲除技术对靶位点的识别是通过与gRNA上20bp左右碱基序列互补配对实现的，但对碱基错配的高度的容忍性降低了CRISPRCas9系统的特异性，合生基因开发了将核酸酶失活的Cas9（dCas9）与核酸酶FokI融合的基因敲除载体；同时将dCas9与转录激活因子VP64融合 可实现基因的转录激活。对于在细胞中长期表达实验需要的，亦可以订购不同抗性的慢病毒载体；也可通过构建荧光融合蛋白或2A连接的荧光蛋白的载体来检测Cas9表达量。