肿瘤细胞学分析实验
一、增殖实验
1. MTT/CCK8实验
2. BrdU 渗入实验(需要标记 FITC,和 GFP 一般不兼容)
3. Ki67 免疫荧光实验(需要标记荧光,和 GFP/RFP 等荧光标记一般不兼容)
4. Cell cycle 流式细胞检测实验
5. 克隆形成实验(colony forming assay)
1)平板克隆形成试验(贴壁细胞适用)
2)软琼脂培养克隆形成试验(悬浮细胞等适用)
二、凋亡实验
1. AnnexinV/PI 双染法检测细胞凋亡(早期凋亡,需要标记 FITC,和 GFP 一般 不兼容)
2. TUNEL 法检测细胞凋亡(晚期凋亡)
一般采用 Roche 的一步法 kit,需要标记 FITC,和 GFP 一般不兼容。
3. Caspase3/8/9 Western Blot检测
4. DNA Ladder(现在极少用)
5. 彗星实验(现在极少用)
三、迁移、侵袭实验
1. 划痕实验
2. Transwell 实验检测迁移(不需要 Matrigel)
3. Transwell 实验检测侵袭(需要 Matrigel)
四、内皮成管实验
1、通过 condition medium 或者 coculture 模型,检测肿瘤细胞对内皮成管能力的影响:
2、内皮细胞成管实验(HUVEC Matrigel tube formation Model)
五、动物实验
1. 裸鼠成瘤实验检测成瘤能力
2. 小动物活体成像实验(需要荧光标记)
3. 血液/组织液中 LDH 检测