糖基化是蛋白质药物极其关键的质量属性,对产品的活性、稳定性均有重大影响。因此,糖基化是蛋白药物必须研究的翻译后修饰。
普信可采用多重策略对蛋白质产品的糖基化进行分析:
服务策略1:全分子量水平
使用UPLC-MS检测产品的全分子量,通过对比序列,得出其糖基化修饰。
服务策略2:亚基分析
使用IdeS 酶将单抗类产品降解成亚基,而后通过UPLC-MS对各个亚基进行分子量分析,对照序列得出其糖基化修饰。
服务策略3:糖肽分析
使用Trypsin对样品进行酶解,而后使用UPLC对糖肽进行分离,在线LC-MS/MS检测(CID/HCD或ETD),对照理论序列得出糖基化修饰。
服务策略4:N-糖糖苷分析
使用PNGase F释放出蛋白质的N糖糖苷并2-AB标记,再使用HILIC柱对糖苷标记产物进行LC-MS分离并检测分子量,用以鉴定糖苷类型。
技术优势
可采用多重策略对蛋白质产品的糖基化进行分析
鉴定分析耗时相对较短
检测灵敏度高,重复性好
案例分析
应用领域
鉴定糖基化蛋白中N-糖基化位点
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