凝胶迁移实验,又称凝胶阻滞或电泳迁移率实验(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一种研究DNA与蛋白、RNA与蛋白相互结合的技术,可用于定性(确定蛋白是否与DNA或RNA结合)和定量(确定蛋白与DNA或RNA结合活性)分析。
检测原理:将纯化的蛋白和细胞粗提液与DNA或RNA探针一同保温,在非变性的聚丙烯凝胶电泳上,DNA-复合物或RNA-复合物比没有结合的游离探针移动得慢。实验中可设置阴性对照和阳性对照、竞争实验来确定DNA或RNA结合蛋白的特异性。
服务内容:1、核蛋白抽提。
2、探针合成。
3、EMSA检测。
服务流程:1、客户提供细胞、组织样本或者纯化蛋白;
2、样本核蛋白提取并测定蛋白量;
3、蛋白质与DNA探针结合反应;
4、聚丙烯酰胺凝胶电泳;
5、电转移;
6、紫外交联、封闭;
7、客户提供一抗或公司代购(选做supershift步骤);
8、抗体孵育(选做supershift步骤);
9、洗脱平衡;
10、化学发光反应及图像显示。
您需要提供的信息: - 检测样本为细胞、组织或纯化蛋白。
- 目标基因探针序列。
- 提供实验相关的文献资料。
服务周期:根据试剂盒订购周期,一般3-4周。
实验结果:我们将完成样本处理,指标测定,并根据您的要求提供完整的实验报告。实验报告包括详细的实验方法及实验结果的相关数据。
客户须知:对预做实验提供的样品要求:新鲜的组织、细胞样品,需低温(-80℃)保存提供到我公司。
因用户所提供的样品或试剂所导致的实验问题,由用户负责。