COR-L105人原发性非小细胞肺癌细胞系 细胞ZX复苏传代

COR-L105人原发性非小细胞肺癌细胞系 细胞ZX复苏传代
乙醇酸盐培养基(Brewer)，英文名：Thioglycollate Medium (Brewer)，用途：以美蓝/亚甲基蓝为指示剂，用于厌氧菌培养
植物胨酵母琼脂，英文名：Phytone Yeast Extract Agar，用途：用于皮肤真菌尤其是癣状毛癣菌等致病性真菌的选择性分离
麦氏(Meclary)琼脂，英文名：Meclary Agar，用途：用于真菌培养
YSG琼脂培养基基础，英文名：YSG Agar Medium Base，用途：用于耐热耐酸菌的检测,需使用1N或调节pH
人抗髓鞘相关糖蛋白抗体(MAG Ab)ELISA试剂盒，英文名：Human MAG Ab ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠黑色素瘤标记物(MART/Melan-A)ELISA试剂盒，英文名：MART/Melan-A ELISA Kit，规格：48T/96T
253J细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
OCI-LY19细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
卵黄琼脂培养基基础，英文名：Egg Yolk Agar Base，用途：用于梭菌的分离培养,每100ml添加2支50%卵黄盐水悬液
Karmali氏弯曲杆菌琼脂培养基基础，英文名：Karmali’s Campylobacter Medium，用途：用于弯曲菌的选择性分离培养,每100ml添加1支Karmali氏弯曲杆菌琼脂培养基添加剂（含头孢哌酮、化血红素、万古霉素）
细胞背景资料：详见相关文献介绍
SCDLP液体培养基基础，英文名：Soya Casein Digest Lecithin Polysorbate Broth Base，用途：用于样品的增菌,每升培养基添加1支吐温80
LPM琼脂基础(含七叶苷与柠檬酸铁铵)，英文名：LPM Agar with Esculin and Ferric Iron Base，用途：用于李氏菌选择性增菌,每100ml添加拉氧头孢溶液、β-乙醇各1支
TK-1细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
PCI-04B细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
WM451细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞传代注意事项：①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次Z好只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材；②每天观察细胞形态，掌握好细胞是否健康的标准：健康细胞的形态饱满，折光性好，生长致密时即可传代；③如发现细胞有污染迹象，应立即采取措施，一般应弃置污染的细胞，如果必须挽救，可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗，随后培养基中加入较大量的抗生素，并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持：细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的特点，要做好建系的维持必须记录好细胞档案,换液传代和做好细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。
PtK1(NBL-3)细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MPVECs细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HEK293A细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。传代细胞培养操作步骤：1)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；2)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；3)置37℃孵箱或室温(25℃温度)下进行消化，2-5min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；4)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；5)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；6)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO2培养箱中进行培养；7)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般2-3d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结1：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结2：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过7%，大于5%，太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。5、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝换课题，这个见得太多了，别不当会事。
TA2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
OKa-C-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SACC-LM细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
LS 174T细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
BJ细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
JF-305细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代
MeT-细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
改良NBB琼脂基础，英文名：NBB Agar Base,Modified，用途：用于啤酒中厌氧菌的检测
普通肉汤培养基，英文名：Routine Broth Medium，用途：用于金黄色葡萄球菌及其他细菌的增菌
抗生素培养基4号，英文名：Medium 4（Yeast Beef Agar），用途：用于微生物方法测定抗生素效价
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基(YPD)，英文名：Yeast Extract Peptone Dextrose Agar，用途：用于真菌计数
HPAEpiC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
VERO C1008[Vero 76,clone E6,Vero E6]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
DB细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长 ；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞传代方法：每周换液2-3次。
A9细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
EMT-6细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
BRL-3A细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H2122[H2122]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Clone9细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
9K培养基，英文名：Nine K Medium(9K Medium)，用途：用于氧化亚铁杆菌的培养,需添加
大鼠抗中性粒细胞核周抗体(PANCA)ELISA试剂盒，英文名：PANCA ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞形态特性：详见细胞说明书
人异戊烯半胱酸氧化酶1(PCYOX1)ELISA试剂盒，英文名：Human PCYOX1 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠血小板因子4(PF4/CXCL4)ELISA试剂盒，英文名：Mouse PF4/CXCL4 ELISA Kit，规格：48T/96T
人吡哆醛/吡哆醇维生素B6酶(PDXP)ELISA试剂盒，英文名：Human PDXP ELISA Kit，规格：48T/96T
AC16细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H1836细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：每周换液2-3次。
察氏琼脂，英文名：Czapek Dox Agar，用途：用于青霉和曲霉的分离鉴别
牛津琼脂(OXA)基础，英文名：Oxford Agar Base，用途：用于李氏菌分离,每100ml添加多粘菌素E1支
Korser氏柠檬酸盐肉汤，英文名：Korser’s Citrate Broth，用途：用于柠檬酸盐利用实验
胰蛋白胨胆汁琼脂(TBA)，英文名：Tryptone Bile Agar，用途：用于大肠菌群滤膜法检测
人精脒/精胺N1-乙酰基转移酶1(SAT1)ELISA试剂盒，英文名：Human SAT1 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人V-Rel网状内皮增生病毒癌基因同源物B(RELB)ELISA试剂盒，英文名：Human RELB ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠C-肽(C-Peptide)ELISA试剂盒，英文名：Mouse C-Peptide ELISA Kit，规格：48T/96T
Hs 819.T细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维；细胞传代方法：1：2—1：3传代；每周换液2-3次
c666-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
阿姆斯壮镰刀菌培养基基础，英文名：Armstrong Fusarium Medium Base，用途：用于镰刀菌的培养，每100ml培养基中添加1支阿姆斯壮镰刀菌培养基添加剂
KM8P培养基，英文名：Kao&Michayluk Medium，用途：用于原生质体的培养，每100ml需添加2ml椰子乳
胰化大豆坚固绿琼脂(TSAF)，英文名：Tryptic Soy Fast Green Agar，用途：用于滤膜法细菌总数测定
人甲肝抗体IgM(HAV IgM)ELISA试剂盒，英文名：Human HAV IgM ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠白介素11(IL-11)ELISA试剂盒，英文名：Mouse IL-11 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠抗心磷脂抗体IgA(ACA-IgA)ELISA试剂盒，英文名：ACA-IgA ELISA Kit，规格：48T/96T
SK-MEL-28细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：星形的；细胞传代方法：1：3-1：8传代，2-3天换液1次。
PC14细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
WTRL1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。