赫利森化学发光酶联免疫测定底物试剂盒(Substrate Kit for CLEIA)是用于化学发光酶免疫测定(chemiluminescent enzyme immunoasssay,CLEIA),在2次抗原抗体反应后作为酶反应作用底物加入参与反应。该产品基于新一代增强型化学发光底物研制而成,在HRP的催化下发生化学反应而发光,可用于检测人血清或血浆中的病毒表面抗原。其高灵敏度能够检测低皮克(pg)级别的抗原,发光信号强烈持久,可以使用微孔板式化学发光检测仪进行测定。
主要用途: 人血清或血浆中的病毒表面抗原测定中的酶反应底物
特征/优点:
1. 发光信号强烈而且持久,较传统的对-碘苯酚为增强剂的发光液高2个数量级以上。
2. 信噪比高(见图1),灵敏度高,很容易检测到底pg级的抗原。
3. 稳定性好,A、B单独存放2-8℃避光条件下12个月,发光值衰减小于5%。
图1. 赫利森超灵敏化学发光酶联免疫测定底物试剂盒与其它国内产品对比。在肠道病毒EV71的化学发光检测实验中赫利森产品的信噪比是其它产品的4倍以上。
使用方法:将 A液和 B 液取出,平衡至室温,1:1 混合均匀后使用。
保存条件:避光、2-8℃
有 效 期:12个月
操作步骤:(参考)
1. 二抗在微孔板上孵育完毕后,用洗涤剂充分洗涤,一次洗板结束后尽量扣干
2. 于上述微孔板上每孔加入发光底物A、B液各50uL,轻轻振摇混匀(或者在SY前30分钟内将A、B液预先1:1混合好后100uL/孔加入微孔板)
3. 用微孔式化学发光检测仪检测各孔的发光强度。读取结果时,待测板在加完底物后10分钟内必须必须进入仪器,并保证在仪器中避光5分钟后开始检测(设定检测延迟5分钟)
注意事项:
1. 为获得实验结果,请务必优化实验条件,包括检测样品的用量、一抗、二抗稀释度、杂交膜及封闭试剂的选择。
2. 由于奶粉中含有内源性生物素,在使用亲和素/生物素系统时,封闭液中应避免使用奶粉。
3. 建议在封闭缓冲液及所有抗体稀释液中加入高质量的吐温-20(终浓度为0.05%),以减少非特异性结合。
4. 由于叠氮钠是HRPYZ剂,在缓冲液中应避免使用叠氮钠作为防腐剂。
5. 避免长时间中断实验步骤,洗板步骤结束后,必须立即进行下一个步骤,不可使微孔板干燥,确保每孔实验条件均一。
6. 避免在有挥发性物质或次氯酸类消毒剂(如84消毒液)的环境下操作。
7. 避光条件下,配制好的化学发光检测底物工作液可在室温下稳定保存8小时。如暴露于阳光或其他强光下,工作液会受影响。为获得效果,可于棕色瓶中配制工作液,避免强光长时间的照射。正常实验室灯光短时间照射不影响工作液的使用。
温馨提示:不可用于临床ZL。