纯化方法 | 描述/优点 |
脱盐(iDSL) | 合成完全的寡核苷酸通过高纯氨气混合水蒸汽,在高温高压下将连接在CPG上的引物切下来后通过普通相层析柱进行层析除盐。 |
高亲和纯化/Cartrige纯化 | 基于特异或反向层析法,从合成好的产物中去除失败序列.提供某些应用中的全长序列,适于35个碱基以下的引物.HPLC鉴定纯度介于85-90%,毛细管电泳(Capillery Electrophoresis)鉴定纯度介于75-80%。 |
聚丙烯酰胺电泳(PAGE) | 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)基于尺寸和构象分离全长产物和失败序列,可以分离相差一个碱基的引物(120碱基以内),从而提供高纯度的引物. HPLC鉴定纯度大于95%甚至97%, 毛细管电泳(Capillery Electrophoresis)鉴定纯度大于85%。 |
GX液相(HPLC) | 反相GX液相(HPLC)同高亲和纯化/Cartrige纯化的原理一样,可以除去失败序列或未结合的标记物.但因HPLC柱的分辨率更高,因此可以提供比高亲和纯化/Cartrige纯化纯度更高的引物.HPLC鉴定纯度大于95%, 毛细管电泳(Capillery Electrophoresis)鉴定纯度大于85%. HPLC纯化的引物会随着碱基数的增加而纯度降低,一般不适于50个碱基以上的引物。 |