REAGEN™黄曲霉毒素B1酶联免疫反应试剂盒RNM980071.概述REAGEN™黄曲霉毒素B1酶联免疫反应测试盒是用于检测谷类,饲料,肌肉,牛奶,豆奶,花生和阿月浑子(开心果)中黄曲霉毒素B1的残留。该试剂盒特点包括:高回收率(80-115%),快速(10-40分钟)。高灵敏度(
REAGEN™黄曲霉毒素B1酶联免疫反应试剂盒RNM98007
1.概述
REAGEN™黄曲霉毒素B1酶联免疫反应测试盒是用于检测谷类,饲料,肌肉,牛奶,豆奶,花生和阿月浑子(开心果)中黄曲霉毒素B1的残留。该试剂盒特点包括:
Ø 高回收率(80-115%),快速(10-40分钟)。
Ø 高灵敏度(0.05ng/g或ppb)
Ø 高重现性。
Ø 快速的ELISA检测方法(在不考虑样品数量下只需不到2小时)。
2.试剂盒原理
REAGEN™黄曲霉毒素B1酶联免疫反应测试盒基于竞争性酶联反应原理,抗原已经包被于微孔板上。分析时,样品同一抗加入孔中,如果样品中含有毒素,会竞争抗体,因而YZ板上包被的毒素与抗体结合。HRP标记的二抗,与结合在板上一抗相结合后,加入TMB底物,底物的颜色显色强度与样品中毒素的含量成反比。
3.试剂盒组成
内容物 | 规格 | 保存 |
黄曲霉B1包被板(Aflatoxin B1Coated Plate) | 96孔板(12×8 孔) | 2-8℃ |
黄曲霉毒素B1标准品(Standards): 0ng/ml阴性质控(Negative control) 0.05ng/ml 0.1ng/ml 0.2 ng/ml 0.4ng/ml 0.8 ng/ml 回收用100ng/ml(Spiking,可选) | 1.0mL 1.0mL 1.0mL 1.0mL 1.0mL 1.0mL 1.0mL | 2-8℃ |
黄曲霉毒素B1一抗(Aflatoxin B1 Antibody #1) | 15mL | 2-8℃ |
HRP-酶标二抗(HRP-Conjugated Antibody #2) | 18mL | 2-8℃ |
20×浓缩洗液(Wash Solution) | 30mL |
终止液(Stop Buffer) | 20mL |
TMB底物(Tmb Substrate) | 10mL |
本试剂盒应当在2-8℃的温度下储存,有效期为一年。如果一个月内不使用试剂盒,黄霉
素毒素B1标准品,一抗和1×HRP-二抗应置于-20℃或者冷冻保藏。
4.检测限
检测物质 | 检测下限(ng/g) |
干肉/鱼,谷类,饲料,种子 | 1.0 |
肌肉/肝脏/肾脏 | 0.5 |
牛奶、豆奶 | 0.4 |
花生酱 | 0.5 |
蔬菜/豆类/花生/橄榄油 | 1.0 |
5.交叉反应
药物 | 交叉反应率(%) |
黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1) | 100 |
黄曲霉毒素B2(Aflatoxin B2) | 49 |
黄曲霉毒素M1(Aflatoxin M1) | 45 |
黄曲霉毒素M2(Aflatoxin M2) | 24 |
黄曲霉毒素G1(Aflatoxin G1) | 37 |
黄曲霉毒素G2(Aflatoxin G2) | 8 |
6.其他需要而本试剂盒未提的设备或材料
1) 酶标仪(450nm)
2) 恒温培养箱
3) 匀质器
4) 漩涡振荡器
5) 微量加样器(10、20、100和1000mL各一支)
6) 多道枪:50-300mL
7) 甲醇、正己烷
7.注意事项
实验前请阅读以下文字,以保证获得实验效果。
1) 标准品中含有黄曲霉毒素B1,请小心使用。
2) 不要使用过期的试剂盒。
3) 不同批次的试剂盒不要混用,抗体和微孔板具有盒与批次的特异性。
4) 尽量保持室温20-25℃,避免在通风口操作防止温度过低,过热和/或者蒸发。同样的,不要在阳光直射下实验,防止过热及蒸发。在孵育期间,如果工作台温度过低,应该铺垫若干纸巾或者其他物料。
5) 水质量很重要,确保使用蒸馏或者去离子水。
6) 加入样品或者试剂到空的微孔板时,吸嘴靠于微孔接近底部,并保持接触。
7) 孵育时间的计算越规范越好,保持添加标准品的一致性,先添加标准品后添加样品。
8) 从低浓度到高浓度地添加标准品,降低影响标准品曲线质量的风险。
9) 将微孔板置于放有干燥剂的密封袋中,冷藏保存。
8.样品的准备
样品保存在2-4℃不超过1-2天,如果需要保存较长的时间,应该放置-20℃。样品使用前应恢复到室温。
1) 干肉/鱼,谷类,饲料,种子,坚果
(1) 研磨并混匀适量的样品;
(2) 称取5g磨碎的样品,放入适当的容器中;
(3) 加入25mL 70%甲醇,用手或者振荡器剧烈振荡5分钟;
(4) 室温(22.5±2.5)°C下4000 rpm离心10分钟;
(5) 取100μL上清液加入0.9mL 35% 甲醇;
(6) 取50μL作检测。
稀释倍数:50
备注:如果需要,样品所取的量可以增加,同时甲醇/水的用量也必须作相应的改变。例如取10g样品,应该加入50mL70%甲醇。也可以适当调整稀释倍数,如100倍。