人α半乳糖苷酶(αGAL)ELISA试剂盒酶标板洗涤时各孔均需加满洗涤液,防止孔内有游离酶不能洗净。应设定30~60s的洗涤浸泡时间。
产品资料
产品详细介绍:
【产品名称】:人α半乳糖苷酶(αGAL)elisa试剂盒
【产品用途】:被测样品定性定量分析
【产品规格】:96T/48T(两种规格)
【检测方法】:酶免法/酶联免疫法(ELISA)
【保存条件】:2-8℃
【供 货 期】:1-3天(现货供应)
【产品性状】:液体盒装
【产品价格】:(含税含运费,我们全程提供ELISA实验技术指导和ELISA试剂盒免费代测)
【销售优势】:价格行业优势、质量可靠、如果出现客观质量问题包换退
【待检样本】:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等
【产品保质期】:半年(六个月)
进口试剂盒的实验使用需您用心对待,实验中主要注意到:
1.滴加试剂前应将滴瓶翻转数次,使液体混匀。滴加时瓶身应保持垂直,以使滴量准确。
2.从冷藏环境中取出时应在室温环境中平衡30min后方可使用,未用完的微孔条用自封袋密封保存。
3.所有样品和废弃物都应按传染源处理。终止液为2mol/L硫酸,使用时应注意安全。
4.若标本OD值在标准曲线测定范围以外,应适当稀释后重测。
5.每批样本应同时做标准曲线。
6.酶标板洗涤时各孔均需加满洗涤液,防止孔内有游离酶不能洗净。应设定30~60s的洗涤浸泡时间。
工作原理
人α半乳糖苷酶(αGAL)ELISA试剂盒 检测概述
ELISA(酶联接免疫吸附反应分析)是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的GX催化作用相结合起来的一种敏感性很高的实验技术。 由于抗原、抗体的反应在一种固相载体-聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。
实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法、用于检测抗原的双抗体夹心法以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。目前我们对客户提供比较常用的ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法服务。
操作流程
人α半乳糖苷酶(αGAL)ELISA试剂盒 操作步骤
1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。
2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
3、加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);每孔再加入酶标工作液100μL;空白对照孔不加。
4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。
6、显色:每孔先加入显色剂A 液50μL,再加入显色剂B液 50μL,37℃避光显色15min。
7、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μL,终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。
8、测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。
9、计算:根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。
注意事项
人α半乳糖苷酶(αGAL)ELISA试剂盒 注意事项
1、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。
2、酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。
3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。
4、若显色过浅,可适当延长底物温育时间。
5、为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头;酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰到微孔;不得重复使用封板膜。
6、试剂盒保质期内使用,不同批号的试剂不得混用。
7、底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
ELISA实验在做到严格要求的同时有着一些不能忽视的小细节:
1.用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
2.液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3.洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
4.吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。s
订购说明
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