Elisa试剂盒，大鼠维生素B12(VB12)ELISA Kit现货供应

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大鼠ELISA试剂盒产品简介：

1．试剂盒保存：-20℃(较长时间不用时)；2-8℃(频繁使用时)。

2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。

3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。

4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。

大鼠ELISA试剂盒操作步骤：

1）使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

2）根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。 每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加 入50ul于反应孔内。

3）加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物 素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

4）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3 次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

5）每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

6）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

7）每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。

8）取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

9）在450nm波长处测定各孔的OD值。

6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。

1. 灵敏度：***小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

2. 特异性：不与其它细胞因子反应。

3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

大鼠ELISA试剂盒工作原理：

用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗该指标抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗该指标抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的该指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)，计算样品浓度。

试剂盒组成及试剂配制：

1.酶联板(Assay plate )：一块(96孔)。

2.标准品(Standard)：2瓶(冻干品)。

3.样品稀释液(Sample Diluent)：1×20ml/瓶。

4.生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent)：1×10ml/瓶。

5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent)：1×10ml/瓶。

6.生物素标记抗体(Biotin-antibody)：1×120μl/瓶(1：100)

7.辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin)：1×120μl/瓶(1：100)

8.底物溶液(TMB Substrate)：1×10ml/瓶。

9.浓洗涤液(Wash Buffer)：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

10.终止液(Stop Solution)：1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

大鼠ELISA试剂盒主要优点:

一、GX、灵敏、特异的抗体；

二、稳定的重复性和可靠性；

三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体；

四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；

五、限度的节省实验经费。

大鼠ELISA试剂盒注意事项：

1. 用户在初次使用试剂盒时，应将各种试剂管离心数分钟，以便试剂集中到管底。

2. 每次实验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只是加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。

3. 为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。

4. 未使用完的酶标板或者试剂，请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

大鼠ELISA试剂盒常见问题：

1. 问－－客户用48T试剂盒，大概只有十个样所以他一次用不完那么多板条，但是他想做两次，可封板膜只有一张，那如果用完了怎么办？可以用什么别的东西取代吗？

答－－可以把封板膜剪掉，用多少剪多少也可以用封口膜替代。

2. 问－－实验过程中温育是放在哪温育呢？

答－－可以在水浴箱、细胞培养箱和烘干箱里面都行，只要恒定温度为37度。

酶联免疫的洗涤在ELISA过程中虽不是一个反应步骤，但却也决定着实验的成败。ELSIA?是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质，以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的，而在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。可以说在ELISA操作中，洗涤是Z主要的关键技术，应引起操作者的高度重视，操作者应严格按要求洗涤，不得马虎。

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适用范围：

科研用检测试剂

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我公司实验室现已拥有多个检测系统：

1．ELISA双抗夹心法检测系统

2．ELISA间接法检测系统

3．ELISA竞争法检测系统

4．ELISA捕获包被法检测系统

5．ABS-ELISA检测系统

1. 明确检测何种蛋白；

2. 明确编码该蛋白的基因与其它哪些物种同源性Z好；

3. 寻找检测这些物种蛋白的试剂盒；

4. 咨询上海酶远使用的抗体类型；

5. 做出自己的判断该买哪个试剂盒。

大鼠ELISA试剂盒代测服务：

服务编号    服务项目    内容说明    提交结果    周期

RGSc1    间接法ELISA检测    客户提供检测材料    检测试验报告    1周

RGSc2    夹心法ELISA检测    客户提供检测材料和检测试剂盒    检测试验报告    1周

RGSc3    竞争法ELISA检测    客户提供检测材料和检测试剂盒    检测试验报告    2周

在寄ELISA试剂盒标本的同时，需要您注明：标本编号、所测项目、是否做复孔、联系方式、实验后标本是否寄回。

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