4%-20%梯度预制胶，12孔 蛋白质研究

名称：4%-20%梯度预制胶，12孔 蛋白质研究
产地：国产|进口
英文名：Precast Protein Gels, 4%-20%, 12 wells
品Pai：百奥莱博
编号：SY0371
本品通过pH中性缓冲液制备，丙烯酰胺与甲叉丙烯酰胺配比是29：1，其规格为浓缩胶5%，分离胶4-20%，胶板尺寸10×8cm，凝胶厚度1 mm，12孔梳齿，单孔上样量30 µl。电泳及转膜缓冲液使用传统的tris-glycine缓冲液，蛋白条带直且尖锐。本品兼容Biorad，天能及北京六一的mini胶电泳槽及其他任何胶板宽度在10 cm的电泳槽。

蛋白电泳经常使用聚丙烯酰胺凝胶来实现蛋白分离，此类凝胶一般由浓缩胶和分离胶两部分组成，前者起到将蛋白样品进行浓缩的作用，后者则是根据凝胶所使用的丙烯酰胺单体和N,N-亚甲基双丙烯酰胺（甲叉丙烯酰胺）交联剂的浓度不同从而分离不同大小范围的蛋白质。与传统实验室自行配制凝胶相比，使用预制胶具有以下优点：1）即开即用，不用再配制N种溶液、灌胶、等胶凝固，节省了宝贵的时间和精力；2）不用接触几种具有积累性神经毒性的试剂（丙烯酰胺/甲叉丙烯酰胺：神经毒性和遗传毒性；TEMED：强神经毒；过硫酸铵：可严重损伤呼吸道，眼睛，皮肤）；3）大规模生产，胶与胶之间重复性好，质量稳定，不像手工灌胶那样结果差异大。

使用方法
1）剪开包装取出胶，撕去胶板底端胶纸，将预制胶固定在电泳槽中，加入电泳缓冲液没过梳齿部位，双手按住梳子左右部位将其平稳缓慢（一定要慢，否则会将胶齿拔断或拔歪）拔出，在前后板的上方ZY卡上一个“V”型卡（通过加固前后板，不仅可防止枪头上样用力过猛撬开两板产生缝隙，还可稳定跑胶质量，电泳过程中“V”型卡不可取出），上样后进行电泳，电泳后取出胶板，用镊子或小螺丝刀沿左右两板间的缝隙将两板别开，将胶取出，弃去塑料板。
2）电泳：使用《分子克隆》指定的 tris-glycine电泳缓冲液（tris 25 mM, glycine 250 mM, SDS 0.1%），也可使用我司的Western Blot电泳电转通用缓冲液（SY0360）。推荐使用低压100V，15min换高压150V跑至电泳结束。
3）转膜：使用《分子克隆》的 tris-glycine 电转缓冲液（含 20%甲醇或乙醇），操作与实验室原有操作完全相同。也可以使用我司的Western Blot电泳电转通用缓冲液（SY0360），无需添加甲醇，无需冰浴，但是需要另行添加20%乙醇，恒压50V电转60 min。

储存条件：4℃，有效期一年。

注意事项
1) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2)本品含有的部分试剂如丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺有毒，对人体有害，请注意适当防护。
3) 电泳及电转缓冲液建议使用新配制的缓冲液，试剂纯度不够，反复使用或长期放置过的缓冲液会降低电泳效果。传统《分子克隆》的tris-glycine 电泳及电转缓冲液是不用 NaOH 和 HCl 调整 pH ，因为引入的钠离子和氯离子会影响电泳效果。
4)电泳前请务必撕去胶板底端的胶纸。
5) 拔掉梳子后，如果偶尔出现胶齿不直的情况，可用注射器针头将胶齿拨正。
6) 本预制胶对于Biorad和天能的电泳内外槽存在微小泄露，可通过两种方式解决本问题：一是内槽加满意缓冲液，外槽液面加至距内槽液面3-5mm，从而可防止在电泳过程中内槽液面逐步下降。另一种解决方式是将Biorad的硅胶封闭垫取出后反过来安装，使其没有凸起的平滑面朝外，从而防止漏液。


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