北京百奥莱博专业生产供应北京现货核酸外切酶 III(E. coli)品牌,我公司销售全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京现货核酸外切酶 III(E. coli)品Pai
品Pai:百奥莱博
编号:SV1086
产地:国产|进口
规格:25KU|5KU|2500U
特性:
3´ →5´ 外切酶活性
非定向巢式缺失
定点突变
链特异性探针的制备
制备用于双脱氧测序的单链底物
概述:
该酶作用于双链 DNA,从 3´ OH 末端方向逐步切去单核苷酸。每次酶与底物结合催化,只有几个核苷酸被除掉,从而在 DNA 分子群内产生渐进缺失。
尽管可以作用于双链 DNA 的切刻产生单链缺口,但该酶Z适底物是平齐末端或 3´ 凹陷末端 DNA。由于对单链 DNA 无活性,因此该酶无法切割 3´ 突出末端。3´ →5´ 外切酶活性对底物的切割程度随 3´ 突出末端的长度而变化,四碱基或更长的突出末端完全不能被切割。这种特性:可以用于对一端为抗性位点(3´ 突出端),另一端是敏感位点(平端或 5´ 突出端)的线性 DNA 分子进行单方向切割。
核酸外切酶 III 的活性部分依赖螺旋结构,并根据序列的不同而有差异(C>A=T>G)。温度、盐浓度:和酶与 DNA的比例对酶活性影响很大,应根据不同的反应调整反应条件:。
据报道,核酸外切酶 III 也有 RNase H、3´ -磷酸酶和脱嘌呤/嘧啶-核酸内切酶活性。
来源:
纯化自 E. coli K-12,BE257/pSGR3 菌株(B.Weiss 惠赠)。
反应条件:
1X BalbBuffer 1
[10 mM Bis Tris 丙烷-HCl,10 mM MgCl2,1 mM DTT(pH 7.0 @ 25℃)],37℃ 温育。
热失活:70℃ 加热 20 分钟。
质保声明:
核酸外切酶 III 经过严格的质控检测,确保该产品具有的活性和纯度。
单位定义:
1 单位指 50 μl 反应体系中,37℃ 条件下,30 分钟催化产生 1 nmol 酸溶性总核苷酸所需要的酶量。
浓度:
100,000 units/ml。
注意事项:
核酸外切酶 III 不能切割硫代磷酸酯键。因此,也可以通过引入一个 α-硫代磷酸核苷酸将 DNA 分子的一端保护起来,以进行单向切割。
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北京现货核酸外切酶 III(E. coli)品Pai
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