肽 N-糖苷酶 F, 重组酶 分子生物学试剂

名称：肽 N-糖苷酶 F, 重组酶 分子生物学试剂
品Pai：百奥莱博
编号：SV1497
产地：国产|进口
规格：75KU|15KU
特性:
去除糖蛋白的 N-连接糖
概述:
肽 N-糖苷酶 F，即 PNGase F，是一种酰氨酶，可以在 N-连接糖蛋白的高甘露糖、杂合和复合寡糖部分Z内侧的 N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）和天冬酰氨残基之间进行切割。PNGase F 还以不含甘油的形式提供，便于在 HPLC 方法中取得效果。
来源:
从脑膜败血性黄杆菌（Flavobacterium meningosepticum）中提取纯化。
反应条件:
将糖蛋白于 1X 糖蛋白变性缓冲液（含 0.5% SDS，40mM DTT）中 100℃ 煮沸 10 分钟使其变性，再在加入1% NP-40 的 1X GlycoBuffer 2 反应缓冲液中，37℃ 温育进行反应。热失活:75℃ 10 分钟。
随酶提供的试剂:
10X 糖蛋白变性缓冲液
10X GlycoBuffer 2 缓冲液
10% NP-40
分子量:
36,000 daltons。
质量保证:
无糖苷外切酶污染，无糖苷内切酶 F1、F2和 F3 活性，无蛋白水解活性。
单位定义:
1 单位指 10 μl 的反应体系中，37℃ 条件下 1 小时 从 10 μg 变性 RNase B 中除去超过 95%的碳水化合物所需要的酶量（65 我公司units = 1 IUB milliunit）。
浓度:
500,000 units/ml。
注意事项:
已知 PNGase F 的活性受 SDS 的YZ，所以在反应混合物中必须加入 NP-40。要使天然糖蛋白去糖基化，建议增加酶量并延长温育时间。

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·PstI-HF限制性内切酶
编号：SV0619
英文名称：PstI-HF Restriction Endonuclease
规格：50KU|50KU|10KU|10KU|5KU
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 10%
BalbBuffer 2.1: 75%
BalbBuffer 3.1: 50%
CutSmart Buffer:
特性:
CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
浓度:
20,000和100,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

·SP6 RNA 聚合酶
编号：SV1339
英文名称：PstI-HF Restriction Endonuclease
规格：10KU|2KU
特性:
制备放射标记的 RNA 探针
合成用于体外翻译的 RNA
合成用于结构、加工和催化性能研究的 RNA
合成 RNA 反义链，调控基因表达
概述:
T3、T7 和 SP6 RNA 聚合酶分别对 T3、T7 和 SP6 噬菌体启动子具有高度的特异性。已开发出多种载体，可将目的基因序列克隆到 T7 和 SP6 启动子下游的多克隆位点中，以克隆的 DNA 为模板体外合成相应的 RNA。用 T7 和 SP6 RNA 聚合酶合成的 RNA 具有 mRNA 的生物特性，可进行准确剪切。实验证实，将克隆的 DNA 序列反向而产生的 RNA 反义链能特异性地阻断体内 mRNA 的翻译。由于 RNA/DNA 杂交体比 RNA/RNA 和 DNA/DNA 杂交体更稳定，因此核酸杂交反应中的检测信号会更强。
来源:
SP6 RNA 聚合酶来自重组 E. coli 菌株，该菌株携带克隆于 Salmonella typhimurium LT2Z 的 SP6 RNA 聚合酶基因。T7 RNA 聚合酶来自重组 E.coli BL21 菌株，该菌株携带可表达 T7 基因 I 的 pAR1219 载体。T3 RNA 聚合酶来自重组 E.coli 菌株，该菌株携带可表达 T3 基因载体。
反应条件:
1X RNAPol 反应缓冲液
[40 mM Tris-HCl (pH 7.9)，6 mM MgCl2，2 mM 亚精胺，10 mM DTT］。反应时需加入各 0.5 mM 的 ATP、UTP、GTP、CTP（不随酶提供）和带有启动子的模板 DNA，分别在 37℃（T3 RNA 聚合酶和 T7 RNA 聚合酶）或 40℃（SP6 RNA 聚合酶）温育。
质保声明:
无 RNA 聚合酶、DNase 和 RNase 污染。
单位定义:
1 单位指在 37℃（T3 RNA 聚合酶）（T7 RNA 聚合酶）或 40℃ 条件下（SP6 RNA 聚合酶），1 小时内将 1 nmol 的 ATP 掺入酸不溶物所需要的酶量。单位活性检测条件请联系我们咨询。
浓度:
T3 RNA 聚合酶:50,000 units/ml；T7 RNA 聚合酶:50,000 units/ml；SP6 RNA 聚合酶:20,000 units/ml。


肽 N-糖苷酶 F, 重组酶 分子生物学试剂