北京百奥莱博专业生产供应北京现货SDS裂解液特价促销,我公司销售全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京现货SDS裂解液特价促销
规格:100ml
产地:国产|进口
英文名:SDS Lysis Buffer
品Pai:百奥莱博
SDS裂解液是以SDS为主要组分的裂解液,具有较强的裂解强度,另含有sodium pyrophosphate,β-glycerophosphate,sodium orthovanadate,sodium fluoride,EDTA,leupeptin等多种YZ剂,可以有效YZ蛋白降解。裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、ChIP等实验。
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期12个月。
注意事项
1)需自备PMSF。
2)裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3) 用SDS裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度(SY0298)。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
(一) 细胞样品
1)融解SDS裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的浓度为1mM。
2)贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液清洗细胞一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。如果用于ChIP,初步裂解后需在冰浴上继续裂解10分钟。
悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成5×105~1×106个细胞/管,然后再裂解。如果用于ChIP,初步裂解后需在冰浴上继续裂解10分钟。
3)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和ChIP等操作。
裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入150μl裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。如果用于ChIP,建议6孔板每孔细胞至少加200μl裂解液。
(二)组织样品:
1)把组织剪切成细小的碎片。
2)融解SDS裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的浓度为1mM。
3)按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
4)用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。如果用于ChIP,初步裂解后需在冰浴上继续裂解10分钟。
5)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和ChIP等操作。
6)如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得充分。
我公司的北京现货SDS裂解液特价促销,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销售下列产品:
·ERRE-GFP报告基因质粒
编号:SY0215
英文名称:ERRE GFP Reporter Plasmid
规格:1μg
ERRE-GFP报告基因是用于检测ERRE转录活性水平为目的的报告基因。ERRE(ERR alpha response element) 是ERRα反应元件, ERRα优先结合ERRE中的位点。
ERRE-GFP报告基因主要应用于Estrogen Receptor Related Receptor信号通路、药物研究、相关基因的调控和功能的研究。
pGMERRE-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个ERRE结合位点,可以GX地检测ERRE的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因,更便于后续的检测。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。另外,由于质粒体积减小,使得ERRE-GFP报告基因更易于转染。
质粒图谱
pGM ERRE -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’
使用说明
pGMERRE-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。
注意事项
1)本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
储存条件:-20℃。
北京现货SDS裂解液特价促销
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