北京百奥莱博专业生产供应北京现货细胞膜固定剂促销,我公司销售全品类的细胞生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京现货细胞膜固定剂促销
编号:SY0540
英文名:Cell Membrane Fixation Buffer
产地:国产|进口
品Pai:百奥莱博
固定剂、破膜剂用于细胞内细胞因子染色前对细胞膜的处理。固定剂起稳定细胞膜、保持细胞膜表面抗体与抗原结合的作用;破膜剂使流动的、完整的细胞膜产生小孔以利于抗体进入细胞。用流式细胞仪检测细胞内抗原及DNA时,对待测细胞进行固定、破膜处理后,加入相应抗体或检测试剂,孵育一定时间即可上机分析。
产品组分
4%多聚甲醛、NaOH、NaH2PO4 、1%胎牛血清;pH 7.4-7.6
应用实例
1. 收获待测细胞,1000 rpm离心10 分钟,弃上清。
2. 加入 500 ul预冷(4℃)固定剂。
3. 室温孵育10 分钟。
4. 1000 rpm离心10 分钟。
5. 弃上清,加入PBS洗一次,1000 rpm离心10 分钟。
6. 弃上清,加入1.5 ml破膜剂。
7. 室温孵育10-15 分钟。
8. 1000 rpm离心5 分钟。
9. 弃上清,加入适量破膜剂重悬细胞。
10. 加入检测抗体进行染色后,用流式细胞仪进行分析。
储存条件:4℃避光,勿冰冻,有效期一年。
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·SMAD-GFP报告基因质粒
编号:SY0195
英文名称:SMAD GFP Reporter Plasmid
规格:1μg
SMAD-GFP报告基因是用于检测SMAD2/ SMAD3/ SMAD4转录活性水平为目的的报告基因。SMAD(drosophila mothers against decapentaplegic )蛋白家族在将TGF-β信号从细胞表面受体传导至细胞核的过程中起到关键性作用,且不同的Smad介导不同的TGF-β家族成员的信号转导。TGF-β信号通路涉及细胞的增殖和分化,在肿瘤发生与进展、细胞外基质形成和免疫调节等过程中发挥重要作用。
SMAD-GFP报告基因主要用于检测细胞中TGFβ信号通路、药物研究、基因过表达和RNAi的表型分析等。
pGMSMAD-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个SMAD结合位点,可以GX地检测SMAD的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因,更便于后续的检测。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。另外,由于质粒体积减小,使得SMAD-GFP报告基因更易于转染。
质粒图谱
pGM SMAD -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’
使用说明
pGMSMAD-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。
注意事项
1)本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
储存条件:-20℃。
·10%预制胶,12孔
编号:SY0373
英文名称:Precast Protein Gels, 10%, 12 wells
规格:1盒(10块)
本品通过pH中性缓冲液制备,丙烯酰胺与甲叉丙烯酰胺配比是29:1,其规格为浓缩胶5%,分离胶10%,胶板尺寸10×8cm,凝胶厚度1 mm,12孔梳齿,单孔上样量30 µl。电泳及转膜缓冲液使用传统的tris-glycine缓冲液,蛋白条带直且尖锐。本品兼容Biorad,天能及北京六一的mini胶电泳槽及其他任何胶板宽度在10 cm的电泳槽。
N,N-亚甲基双丙烯酰胺(甲叉丙烯酰胺)交联剂的浓度不同从而分离不同大小范围的蛋白质。与传统实验室自行配制凝胶相比,使用预制胶具有以下优点:1)即开即用,不用再配制N种溶液、灌胶、等胶凝固,节省了宝贵的时间和精力;2)不用接触几种具有积累性神经毒性的试剂(丙烯酰胺/甲叉丙烯酰胺:神经毒性和遗传毒性;TEMED:强神经毒;过硫酸铵:可严重损伤呼吸道,眼睛,皮肤);3)大规模生产,胶与胶之间重复性好,质量稳定,不像手工灌胶那样结果差异大。
使用方法
1)剪开包装取出胶,撕去胶板底端胶纸,将预制胶固定在电泳槽中,加入电泳缓冲液没过梳齿部位,双手按住梳子左右部位将其平稳缓慢(一定要慢,否则会将胶齿拔断或拔歪)拔出,在前后板的上方ZY卡上一个“V”型卡(通过加固前后板,不仅可防止枪头上样用力过猛撬开两板产生缝隙,还可稳定跑胶质量,电泳过程中“V”型卡不可取出),上样后进行电泳,电泳后取出胶板,用镊子或小螺丝刀沿左右两板间的缝隙将两板别开,将胶取出,弃去塑料板。
2)电泳:使用《分子克隆》指定的 tris-glycine电泳缓冲液(tris 25 mM, glycine 250 mM, SDS 0.1%)。推荐使用低压100V,15min换高压150V跑至电泳结束。
3)转膜:使用《分子克隆》的 tris-glycine 电转缓冲液(含 20%甲醇或乙醇),操作与实验室原有操作完全相同。
储存条件:4℃,有效期一年。
注意事项
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2)本品含有的部分试剂如丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺有毒,对人体有害,请注意适当防护。
3)电泳及电转缓冲液建议使用新配制的缓冲液,试剂纯度不够,反复使用或长期放置过的缓冲液会降低电泳效果。传统《分子克隆》的tris-glycine 电泳及电转缓冲液是不用 NaOH 和 HCl 调整 pH ,因为引入的钠离子和氯离子会影响电泳效果。
4)电泳前请务必撕去胶板底端的胶纸,否则电路不通,无法电泳。
5)拔梳子时Z好浸没在电泳缓冲液中拔,一方面由于液体润滑梳子更容易拔,另一方面不会产生气泡。另外拔梳子时越慢越好,如此可防止梳齿被拔断或拔歪。
6)在电泳后开板取胶时,用小号一字螺丝刀或中号镊子插入左右两板间缝隙,用力搬动,两板即可应声分开,此时两板底部还不能分开,要通过掰开两板取出凝胶。
7)在上样前,使用“V”型卡加固前后板(加样和电泳过程“V”型卡不可移动或拔出),使用时只需将一个“V”型卡“轻轻地”(不必卡到底,不掉即可)卡在前后板的上端中间区域,可确保上样不会产生板胶间的缝隙从而导致样品泄露,电泳时“V”型卡不必取出如此可有助于稳定跑胶质量。
8) 本预制胶对于Biorad和天能的电泳内外槽存在微小泄露,可通过两种方式解决本问题:一是内槽加满缓冲液,外槽液面加至距内槽液面3-5mm,从而可防止在电泳过程中内槽液面逐步下降。另一种解决方式是将Biorad的硅胶封闭垫取出后反过来安装,使其没有凸起的平滑面朝外,从而防止漏液。
北京现货细胞膜固定剂促销
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