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名称:北京现货氨苄青霉素钠哪里买
英文名:Ampicillin sodium salt
产地:国产|进口
编号:SY0287
品Pai:百奥莱博
本品为氨苄青霉素钠盐,细胞筛选常用的浓度为50-100μg/ml。Ampicillin,中文名氨苄青霉素,同义名氨苄西林,一种β-内酰胺类抗生素,属于青霉素家族的一员,同样敏感于β-内酰胺酶,后者可裂解氨苄西林的β-内酰胺环。Ampicillin广谱YZ革兰氏阳性菌,阴性菌以及厌氧菌,其YJ机制在于:干扰青霉素结合蛋白(penicillin binding protein,PBP)活性,PBP参与肽聚糖合成的一步,其可催化丙氨酸和赖氨酸残基间形成五甘氨酸交联,此交联维持细胞壁的完整性,并维持细菌的正常生长。另外,Ampicillin仅对生长的大肠杆菌(Escherichia col)具有杀菌作用。
Ampicillin普遍用作细胞培养中的一种选择性抗生素,用于配制含氨苄的LB或LB平板等,也可用于培养细胞的杀菌。AmpicillinYZ革兰氏阴性和革兰氏阳性细菌,Z小YZ浓度(MIC)分别为0.03-3 μg/ml和0.02 - 1.5 mg/ml。高压灭菌的琼脂或培养基需冷却到45-50℃再加入氨苄青霉素溶液,含氨苄青霉素的平板在2-8℃可保存2周。在 37℃培养条件下,氨苄青霉素可稳定3天。
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·免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液
编号:SY0318
英文名称:Lysis Buffer for WB/IP Assays
规格:100ml
本品细胞/组织裂解液,WB/IP裂解液,是一种非变性条件下的裂解液,含有sodium pyrophosphate、β-glycerophosphate、EDTA、sodium orthovanadate和leupeptin等多种YZ剂,可以有效YZ蛋白降解,并能维持原有的蛋白间的相互作用。裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP和Co-IP等实验。
注意事项
1)需自备PMSF。
2)裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3) 用WB/IP裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度(SY0298)。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
(一) 细胞样品
1)融解WB/IP裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的浓度为1mM。
2)贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液清洗细胞一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入100-200μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入100-200μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成5×105~1×106个细胞/管,然后再裂解。因为大团的细胞较难裂解充分,而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触,相对比较容易裂解充分。
3)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入100μl裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到150μl或200μl。
(二)组织样品:
1)把组织剪切成细小的碎片。
2)融解WB/IP裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的浓度为1mM。
3)按照每20mg组织加入100-200μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
4)用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
6)如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得充分。
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期12个月。
北京现货氨苄青霉素钠哪里买
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