天然腔肠荧光素 报告基因检测

名称：天然腔肠荧光素 报告基因检测
英文名：Coelenterazine Native
品Pai：百奥莱博
产地：国产|进口
规格：1×500μg
编号：SY0234
本品为粉末形式供应的天然腔肠素（Coelenterazine native），是海肾荧光素酶（Rluc）和Gaussia荧光素酶（Gluc）等多种荧光素酶的作用底物，也是水母发光蛋白的辅助因子，应用非常广泛，可用于检测活细胞中钙离子浓度，基因报告分析，BRET（生物发光共振能量转移）研究，ELISA，HTS，以及组织或细胞中ROS水平的化学发光检测。

腔肠素（Coelenterazine）是自然界中资源Z丰富的天然荧光素，是绝大多数海洋发光生物（超过75%）的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物，比如海肾荧光素酶（Rluc），Gaussia分泌型荧光素酶（Gluc），以及包括水母发光蛋白（aequorin）和薮枝螅发光蛋白（Obelia）在内的光蛋白（Photoproteins）。其发光原理是：以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下，氧化腔肠素，产生高能量的中间产物，并在此过程中发射蓝色光，峰值发射波长约为450~480nm。与甲虫（或萤火虫）荧光素/荧光素酶系统不同，腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷（ATP），因此更便于体内生物荧光的研究。因此，腔肠素常用作基于荧光分析的报告基因检测以及活体动物检测的发光底物。

腔肠素还能在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光，细胞和组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子能够增强该自发光信号，因此其也可用来检测细胞/组织内活性氧（ROS）水平。

腔肠素具有能量转移的特性— —生物发光共振能量转移（Bioluminescence Resonance Energy Transfer，BRET），利用此特性，当与荧光蛋白如GFP的突变体（增强的黄色荧光蛋白，EYFP）联合使用，在底物腔肠素存在的情况下，荧光素酶（如Rluc）催化底物发生蓝光，能量随之转移到EYFP上，发出绿光（~530nm）。这两个蛋白的相互作用可以通过Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白两者间的相互关系来评估，适用于研究蛋白-蛋白之间的相互关系。另外，由于BRET的信号可通过比较绿光和蓝光的量来进行测定，消减了因细胞数、细胞类型和其他实验变量而引起的数据变量，适用于高通量筛选如药物开发。

更为重要的一个功能，水母发光蛋白复合物（Aequorin）由22kDa的水母蛋白（Apoaequorin protein）、分子氧和底物腔肠素组成。只有当钙离子（Ca2+）与该复合物结合后，腔肠素才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide，同时释放出CO2和蓝色荧光（~466 nm）。正是此Ca2+依赖性的反应过程（见图1），使得腔肠素非常适用于监测活细胞内钙离子水平。与常规的荧光钙离子指示剂相比，其主要具有以下几个优点，1）能检测较大范围的钙浓度 – 从0.1 μM至 >100μM；2）样品无自体荧光，背景荧光低于使用荧光钙离子指示剂；虽然信号比使用荧光钙离子指示剂弱，但是通过成像仪器可以得到更高的信噪比，因此具有更高的灵敏度。3）水母发光蛋白复合体能够稳定维持在细胞内，使其能够进行数小时至数天的钙离子监测。



目前商业化的腔肠素应用Z普遍的是天然腔肠素（Coelenterazine native），另外还有很多腔肠素衍生物如Coelenterazine h、Coelenterazine 400a、Coelenterazine cp、Coelenterazine f、Coelenterazine hcp、Coelenterazine n等被一一合成。理论上这些腔肠素可用于相同的实验，但是由于其发光波长，细胞膜渗透性，光量子效率上的差异，使得其在相同应用上表现出不同的实验效果。因此非常有必要根据具体实验目的选择Z合适的腔肠素底物（见附录1，腔肠素及其衍生物的特性）。

中文别名：天然腔肠素；腔肠素游离酸
英文别名：3,2-Dihydro-2-(p-hydroxybenzyl)-6-(p-hydroxyphenyl)-8-benzylimidazolo[1,2-a] pyrazin-3-one CLZN; Renilla luciferin; Coelenterazine free base
CAS：55779-48-1
分子式：C26H21N3O3
分子量：423.46 g/mol
外观：棕黄色粉末
溶解性：溶于甲醇或者乙醇，不可溶于DMSO
纯度：＞95%（TLC）
结构：


注意事项
1) 腔肠素粉末或者储存液Z好使用惰性气体-氮气或氩气，在密封良好的塑料管中避光保存于-20℃，长期保存于-80℃。管内即使有少量空气进入，也可能造成腔肠素氧化失活，使量化分析的结果难以在不同试验间进行比较。
2) 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

更多有关天然腔肠荧光素 报告基因检测的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销售以下产品：

·AhR-GFP报告基因质粒
编号：SY0189
英文名称：AhR GFP Reporter Plasmid
规格：1μg
AhR-GFP报告基因是用于检测AhR转录活性水平为目的的报告基因。芳香族化合物受体(Aryl hydrocarbon receptor, AhR)是一个核受体转录因子。AhR广泛地参与多
种细胞内的信号通路,包括核受体信号通路,缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor,HIF)信号通路,p53信号通路以及细胞周期信号通路等。AhR通过对细胞内不同信号通路的调节作用
从而影响了细胞的生长,增殖以及分化等过程。另外,AhR与癌症的发生和发展也密切相关,在许多的肿瘤细胞中都发现了AhR的异常表达。

AhR-GFP报告基因主要用于检测细胞中Xenobiotic信号通路、药物研究、基因过表达和RNAi的表性分析等。

pGMAhR-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个AhR结合位点，可以GX地检测AhR的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检
测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得AhR-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGM AHR -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMAhR-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。


天然腔肠荧光素 报告基因检测