北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒厂家在内的一系列细胞生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒厂家
编号:KFS339
品Pai:百奥莱博
产地:国产|进口
英文名:CFSE Cell Proliferation and Tracking Kit
CFSE细胞增殖与示踪检测试剂盒是基于一种新型荧光探针CFDA SE的用于细胞增殖检测和细胞荧光示踪的检测试剂盒。CFDA SE目前被广泛用于替代MTT法或[3H]-thymidine掺入等其它细胞增殖检测方法。
基于CFDA SE荧光标记的细胞增殖检测和[3H]-thymidine掺入、BrdU标记获得的检测结果完全一致,但同时可以提供更多的细胞增殖信息。使用CFDA SE检测可以提供整个细胞群中有多少比例的细胞分裂了1次、2次或更多次数,同时如果和其它荧光探针联用,可以获取不同分裂次数细胞的其它相关信息。
CFDA SE 的全称为Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester,分子式为C29H19NO11,分子量为557.47。CFDA SE可以通透细胞膜,进入细胞后可以被细胞内的酯酶(esterase)催化分解成CFSE,CFSE可以偶发性地(spontaneously)并不可逆地和细胞内蛋白的Lysine残基或其它氨基发生结合反应,并标记这些蛋白。在加入荧光探针CFDA SE后大约24小时,即可充分标记细胞。被CFDA SE标记的非分裂细胞的荧光非常稳定,稳定标记的时间可达数个月。CFSE标记细胞的荧光非常均一,比以前使用的其它细胞示踪荧光探针例如PKH26的荧光更加均一,并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均匀。
由于CFDA SE标记细胞的荧光非常均匀和稳定,每分裂一次子代细胞的荧光会减弱一半,这样通过流式细胞仪检测就可以检测出没有分裂的细胞,分裂一次的细胞(1/2的荧光强度),分离两次的细胞(1/4的荧光强度),分裂三次的细胞(1/8的荧光强度)以及类似的其它分裂次数的细胞。
CFDA SE标记细胞后通常用流式细胞仪进行细胞增殖检测。Z常用于淋巴细胞的增殖检测,也可以用于成纤维细胞、NK细胞等其它细胞的增殖检测,甚至还可以用于细菌增殖的检测。
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·kFluor555标记山羊抗兔IgG(H+L)
编号:KFS403
英文名称:keyFluor555 Goat anti-Rabbit IgG(H+L)
规格:100μL
浓度:2.0mg/ml
储存:4℃避光,有效期6个月(或-20℃避光,有效期一年)
荧光标记的山羊抗兔免疫球蛋白抗体能被荧光显微镜,激光扫描共聚焦显微镜,流式细胞术,荧光吸光检测器检测出。我们所给出的荧光标记宽度使我们的试剂几乎能适用于任何荧光检测机器。
山羊抗兔子免疫球蛋白抗体是为了能和所有类型的兔免疫球蛋白重链和轻链起反应的同类纯化抗体准备的。为了把交叉反应的影响降到,相比于其他抗体,山羊抗兔免疫球蛋白抗体应优先选择从兔免疫球蛋白和血清中提取。标记每个聚合物的标准是每一个免疫球蛋白分子用2-8个荧光团或生物素分子标记。在准备阶段,必须检测样品中有没有非结合的染料,并且把样品在无荧光实验中做检测以确保较低的非特异性染色的可能。
使用说明
1. 在使用前,用微型离心机短暂地分离蛋白质溶液,留取上清液进行实验。这一步除除去了储存中可能形成的蛋白质聚合物,因此减少了非特异性背景染色的可能。
2. 因为在不同的应用条件,染色方法是不同的,所以应该根据经验需要稀释适量的抗体。
3. 对于荧光团和生物素标记抗体, 1-10μg/mL 的终浓度应该适用于大部分的免疫组织化学应用。
4. 对于流式细胞术,1×106个细胞才能等到令人满意的结果。
·细胞凋亡线粒体膜电位检测试剂盒(JC-10)
编号:KFS213
英文名称:JC-10 Apoptosis Detection Kit
规格:10T|20T|50T|100T
本试剂盒可应用于细胞、组织或纯化的线粒体膜电位检测。大量的研究表明线粒体与细胞凋亡密切相关,其中线粒体跨膜电位(△)的破坏,被认为是细胞凋亡级联反应过程中发生的事件之一,它发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体跨膜电位崩溃,则细胞凋亡不可逆转。
本试剂盒采用JC-10 (Enhanced JC-1)一种阳离子脂质荧光染料作为检测线粒体跨膜电位指示剂。JC-100 可以选择性地进入线粒体,且由于膜电位的增加,其颜色会发生从绿色到橙色的可逆性改变。这种特性是由于JC-100 聚合物的可逆结构,在膜极化条件下,它的发射光由520nm(JC-100 单体发射光)转移到570nm (J-聚合体发射光)。当在490nm 处激发时,JC-100 发生从绿色到橙绿色的可逆改变。这两种颜色都可以被流式细胞仪上装好的一般滤光器检测到,因此绿色发射光可以通过荧光通道1(FL1)进行分析,橙绿色发射光可以通过荧光通道2(FL2)进行分析。它除了有潜力用于流式细胞术,也可以用于荧光成像分析。
注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. JC-10 避光保存及使用。
3. 细胞培养至汇合度80-90%,收集细胞量在1×106/Test。
4. 对PH 变化过于敏感的细胞建议用胎牛血清取代Buffer 孵育染色及洗涤,或延长观测时间。
5. 流式细胞仪检测线粒体膜电位变化受到多种因素的影响,因诱导剂、细胞株类型,作用时间的不同而荧光强度比例都有不同,因此没有通用标准的补偿设门指南,因此每个试验需设阴性及阳性对照组进行荧光补偿及设门。
6. 组织需先制备单细胞悬液或提取纯化线粒体后方可进行检测,可选用我司细胞悬液制备试剂盒或线粒体提取试剂盒。
CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒厂家
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