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产品规格:48T/96T
产地:国产/进口
适用范围:仅供科研使用
保存条件:2-8℃
保质期:6个月
产品品Pai:酶远生物
检测波长:450nm
所需样本体积:50-100ul
产品用途:用于测定血清、血浆及相关液体样本
样本类型:适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞上清、组织匀浆等样本
酶远生物供应的其他种属有:人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、兔子、猪、犬、牛、样、鸡、鸭、植物、猫、马、鱼、猴、农残ELISA试剂盒等
人ELISA试剂盒操作流程:
1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。
上海酶远生物科技有限公司专业提供ELISA试剂盒,种属齐全,指标成千上万种,质量好发货及时,稳定的重复性和可靠高,特异性强,的技术团队竭诚为您服务。
人ELISA试剂盒代测服务:
ELISA试剂盒”含税含运费,提供代测,中英文双版说明书,品Pai美国RD、RB、IBL、Omega,保证质量,详情请来电向我司索取信息。
人ELISA试剂盒代正确的选择方法:
1. 明确检测何种蛋白;
2. 明确编码该蛋白的基因与其它哪些物种同源性Z好;
3. 寻找检测这些物种蛋白的试剂盒;
4. 咨询上海酶远使用的抗体类型;
5. 做出自己的判断该买哪个试剂盒。
人ELISA试剂盒产品优势:
1、产品种类齐全、质量可靠、价格优惠、灵敏度高、效果稳定、易保存、操作简单;
2、发货及时;
3、免费提供ELISA试剂盒待测服务,上海拥有自己的实验和技术团队,公司为您提供全方位的售前、售中、售后技术支持,解决实验过程中遇到的问题;
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咨询订购产品,您也可以拨打我公司业务员的电话,或者本网站中留言(会在半个工作日内给您回复去电话),上海酶远“人微球蛋白ELISA试剂盒”感谢大家的支持!
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人ELISA试剂盒标本要求:
1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3.细胞培养物上清或其它生物标本:1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
抗体的酶标记方法及标记效果测定:良好的酶结合物取决于两个条件:即GX价的抗体和高活性的酶。抗体的活性和纯度对制备标记抗体至关重要,因为特异性免疫反应随抗体活性和纯度的增加而增强。在酶标记过程中,抗体的活性有所降低,故需要纯度高、效价高及抗原亲和力强的抗体球蛋白,Z好使用亲和层析提纯的抗体,可提高敏感性,而且可稀释使用,减少非特异性吸附。酶与抗体交联,常用戊二醛法和过碘酸盐氧化法。郭春祥建立的HRP标记抗体的改良过碘酸钠法简单易行,标记效果好,特别适用于实验室的小批量制备。其标记程序为:将5μg HRP溶于0.5ml蒸馏水中,加入新鲜配制的0.06 mol/L的过碘酸钠(NaIO4)水溶液0.5ml,混匀置4℃冰箱30分钟 , 取出加入0.16mol/L的乙二醇水溶液0.5ml,室温放置30分钟后加入含5(g纯化抗体的水溶液1ml,混匀并装透析袋,以0.05mol/L、pH9.5的碳酸盐缓冲液于4℃冰箱中慢慢搅拌透析6小时(或过夜)使之结合,然后吸出,加硼氢化钠(NaBH4)溶液( 5(g/ml)0.2ml,置4℃冰箱2小时,将上述结合物混合液加入等体积饱和硫酸铵溶液,置4℃冰箱30分钟后离心,将所得沉淀物溶于少许0.02mol/L、pH7.4PBS中,并对之透析过夜(4℃),次日离心除去不溶物,即得到酶标抗体,用0.02mol/L、pH7.4PBS稀至5ml,进行测定后,冷冻干燥或低温保存。
人ELISA试剂盒工作原理:
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗该指标抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗该指标抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的该指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
人ELISA试剂盒组成及试剂配制:
1.酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。
2.标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3.样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4.生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6.生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7.辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8.底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9.浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10.终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
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人ELISA试剂盒订购说明:
1、绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。
2、部分非常用产品,需提前1-2日预订,海外期货则需要提前3-6周预订。
3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化,若有变动以订货当日价格为准。
4、每日订单截止时间为16点整,部分城市可到17点整,因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。
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