Afu 尿嘧啶-DNA糖基化酶厂家的品牌:百奥莱博,是优质的工具酶产品,用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多Afu 尿嘧啶-DNA糖基化酶等工具酶产品请联系我司咨询订购。
名称:Afu 尿嘧啶-DNA糖基化酶厂家
品Pai:百奥莱博
产地:国产|进口
规格:200U
编号:BTN130648
英文名:Afu Uracil-DNA Glycosylase
产品简介:
Afu 尿嘧啶-DNA糖基化酶 (Afu UDG) 是 E.coli 尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG) 热稳定的同源蛋白,来源于闪烁古生球菌 (Archaeoglobus fulgidus) 。该酶从含尿嘧啶的 DNA 上催化释放尿嘧啶,能有效地水解双链和单链 DNA 上的尿嘧啶。
本产品具有下列特点:
1.热稳定
2.从双链或单链 DNA 上切下尿嘧啶
活性单位定义:
1 单位指每分钟从含尿嘧啶双链 DNA 上催化释放 60 pmol 尿嘧啶所需要的酶量。通过检测 37℃ 30 分钟内,从 50 μl 含 0.2μg DNA (104-105 cpm/μg) 的反应体系中释放 [3H]-尿嘧啶的量来确定活性。
反应条件:
1X反应缓冲液 (不含 Mg 离子) [10 mM KCl,10 mM (NH4)2SO4,20 mMTris-HCl,0.1% Triton X-100 (pH 8.8 @ 25℃) 。65℃ 温育。
备注:
Afu UDG 在 150 mM NaCl 存在条件下,仍有 50% 的活性。Afu UDG 煮沸30 分钟之后在标准反应条件下仅存少于 1% 的活性。在标准反应条件下,尿嘧啶糖苷酶YZ剂 (UGI) 不能YZ Afu UDG 的活性。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。
除Afu 尿嘧啶-DNA糖基化酶厂家外,我公司正在打折促销以下产品:
·硫酸镁溶液,10mM,PCR级
编号:BTN130840
英文名称:MgSO4 ,PCR Grade
规格:5mL
产品简介:
本产品为专门用于PCR的MgSO4溶液,浓度10mM,可以用于调节MgSO4的浓度。MgSO4为常用的PCR增强剂之一。
运输及保存:
低温运输、-20℃保存,有效期一年。
·DNAzol 基因组DNA快速提取试剂
编号:DN2601
英文名称:MgSO4 ,PCR Grade
规格:50ml|100ml
产品介绍:
DNAzol 是一种完全的、可直接使用的基因组DNA提取试剂,简单GX,结果可靠,可快速提取基因组DNA,适用于多种大量或少量样品。DNAzol 可在一个步骤中裂解细胞并水解RNA,经过乙醇沉淀后即可快速得到基因组DNA。整个过程只需10-30 分钟,DNA 回收率可达70-100%,得到的DNA 不需再纯化,可直接用于Southern 杂交、斑点杂交、分子克隆、PCR 反应和其他分子生物学应用。
产品储存:室温保存至少一年。
注意事项:DNAzol 有毒害性,应避免直接接触皮肤和眼睛。
操作步骤:(实验前请先阅读注意事项)
1. 裂解,匀浆
a. 组织:25-50mg 组织加1ml DNAzol ,使用匀浆仪处理5-10 次。少量(5-10mg)柔软组织,如脾或脑组织,可切成或者捣成小块使用微量取样器吹打混匀,室温放置5-10 分钟。
b. 细胞:单层培养的细胞应直接裂解,倒出培养基,加入DNAzol 用取样器吹打几次混匀。每10cm2 细胞培养板加0.75-1.0ml DNAzol。
c. 细胞沉淀或悬浮液:每1-3×107 细胞(体积小于0.1ml)加1ml DNAzol,反复吹打混匀。
2. 离心 4 -25℃,10000g 离心10 分钟。将得到的上清转入新管。此步骤去除组织碎片、部分水解的RNA和多糖。如果所提样品为含较多细胞和细胞外物质的样品,如肝、肌肉和大部分植物组织等,或要提取不含RNA 的DNA时,可加此步骤。其他样品可省略此步。
3. 沉淀 每使用1ml DNAzol 加0.5ml 乙醇,颠倒离心管5-8 次,混匀样品至出现DNA沉淀,室温放置1-3分钟。可以看见DNA 絮状沉淀,让沉淀自然沉降到管底,尽可能吸弃上清。用枪头搅绕DNA贴附在离心管上端壁上,仔细吸弃剩下的在管底和管壁的上清。如果因为剪切太厉害导致形成小片段或者量少的DNA(少于15ug),无法缠绕到枪头上,可在4 -25℃,4000g 离心1-2分钟沉淀DNA,弃上清。
4. 漂洗 用0.8-1ml 75%乙醇漂洗DNA 两次。漂洗时,将DNA 悬浮在乙醇中,颠倒离心管3-6 次,然后静置0.5-1 分钟使DNA 沉降到管底,尽可能吸弃上清。如果需要,可在4 -25℃,1000g 离心1-2分钟沉淀DNA。从组织中提取DNA 时,如需去除其他内含物,次漂洗可用70%DNAzol 和30%乙醇的溶液代替75%乙醇。
5. 溶解 用枪吸去残余的乙醇,晾干几秒钟后立刻用8mM NaOH溶解DNA(DNA暴露于空气几秒钟都会大大加大溶解难度,因此乙醇晾后立刻溶解)。可将沉淀吸到大口径枪头中缓慢通过数次来帮助解。TE缓冲液和水溶解效果不完全,因此建议用碱溶液,可更快速且彻底的溶解。通常,从107 细胞或10-20mg 动物组织中提取的DNA 可用0.2-0.3ml 8mM NaOH溶解,使DNA浓度约为0.2-0.3ug/ul。
如果从植物、肝脏、肌肉等富含糖原的材料提取DNA,可能会有一些残留物(多糖)无法溶解,可以用12,000Xg离心10分钟去除。8mM NaOH容易被空气氧化,应该用不超过6个月的2-4mol的NaOH储存液,每月配制一次。
6. 结果检测 以8mM NaOH 溶液溶解的DNA(用DNAzol 提取的DNA 在Tris 缓冲液中溶解效果不好)在紫外分光光度计检测A260/A280,A260 为1 相当于50ug 双链DNA/ml。得到的A260/A280 应为1.6-1.9,片段大小为20-100kb。得到的DNA段大小取决于提取过程中机械外力对DNA的破坏程度
·通用型全基因组扩增试剂盒
编号:BTN100941
英文名称:Universal WGA Kit
规格:30次
产品简介:
本产品是用于基因组DNA扩增(whole genome amplification,WGA)的试剂盒,可以方便、简单、快速、经济的得到稳定产量的基因组DNA扩增样品。WGA是基于phi29 DNA聚合酶和随机引物的一种恒温扩增基因组的技术。
本产品有如下优点:
1.即开即用,不需要单独准备所需试剂。
2.可以扩增基因组达上万倍。
3.具有高产量和高保真性的特点。
4.可使用各种来源的样品,包括全血、干血、发根、口腔粘膜刮液、培养细胞、真菌、病毒等。
5.操作简便快捷,整个过程不需要PCR仪。
6.产物可用于多种后续试验,包括多重PCR、长片断PCR、定量PCR、克隆、文库构建、单倍型分析、测序、基因芯片分析、各种遗传分析(片段差异、微卫星差异、SNP、STR)等。
使用及效果:
取2.5 μL基因组DNA加入等体积的变性液,室温放置2分钟后加入5 μL WGA溶液A,混合均匀,再加入10 μL WGA溶液B和0.5 μL phi29 DNA聚合酶,混匀后30℃温育16小时后即可。
运输及保存:
低温运输、-20℃保存、有效期一年。
Afu 尿嘧啶-DNA糖基化酶厂家
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