耐热型 MMLV 逆转录酶 (H-)是珍贵的分子生物学研究材料,但是由于它们的保存时间一般都比较长,很不容易从中提取到可以进行 PCR 的 RNA,存在的主要问题是 RNA的降解和脱蜡过程中样品的丢失。本产品是专门用于从甲醛和非甲醛固定的石蜡包埋组织中快提 RNA 的试剂
产品特点耐热型 MMLV 逆转录酶 (H-)是一种在较高温度下保存 RNA 样品的非冻型无毒溶液,它能迅速渗入细胞内,通过GXYZ RNase 的活性而保存 RNA 的完整性。
安装步骤与维护1. 能浓缩病毒 100 倍以上,适合各种病毒。
2. 比超速离心法、密度梯度离心分离法和过滤法更温和,回收率更高,并且大部分病 毒能保持活性,适合各种后续实验,包括转染实验和核酸纯化。
3. 比超速离心法和密度梯度离心分离法简单,不需要大型离心机等设备。
4. 适合水样、细胞培养基上清和其他不含细胞的样品。本产品 100mL 可以处理 400mL 含病毒的溶液,可以将病毒浓缩 100 倍以上。
5. 已 经 成 功 用 于 coronaviruses 、 rhabdoviruses 、parainfluenzaviruses 、 respiratory syncytial virus、rubella virus、picornaviruses 等病毒。
耐热型 MMLV 逆转录酶 (H-)成 份:250mL 立式盒包装
本产品:3060 250 mL
使用手册:3060sc 1 份
运输及保存 常温运输及保存,有效期二年。
自备试剂 新鲜样品。
使用方法
耐热型 MMLV 逆转录酶 (H-)使用方法 一:用本产品保存新鲜组织样品
1. 估计完全浸没样品所需要本产品的体积(1g 组织需 10 mL)。
2. 标记收集管并加入估计所需量的本产品。
3. 以Z快速度将样品剪切成厚度小于 0.5 cm 的碎块。注: 鼠肝、肾和脾等小器官样品和没有蜡质保护层的植物样品可不需剪切而直接放入本产品中保存,有蜡质保护层的植物样品需要先将蜡表皮破坏。
4. 将组织碎块完全浸没于收集管的本产品中。
5. 将收集管存放于温度适当的地方,存放时间不能超过该温度下的Z长存放时间,如果要存放在-20℃或-80℃,需先将样品在 4℃放置过夜后再转移到的温度。注:将样品转移到-20℃或-80℃前,需要倒弃保护液。常见存放温度与其Z长存放时间关系为如下:
6. 从存放处取出样品 (-20℃或-80℃保存的样品需先在室温下融化),用消过毒的
镊子将组织碎块从保护液中取出。
7. 立即开始 RNA 提取或进行其他处理 (如将样品分割成更小的碎块再重新保存
等)。注:样品可以反复冻融二十次而其 RNA 质量不会受到影响。
二:耐热型 MMLV 逆转录酶 (H-)保存培养细胞、悬浮细胞、细菌和 RNA 病毒
1. 标记收集管。
2. 将待样品转移到离心管中,离心收集细胞,弃上清。注:处理含病毒的样品(如
血浆)可直接从步骤第 4 步开始。
3. 用冰浴的缓冲液洗一次。
4. 将细胞悬浮在少量缓冲液中。
5. 加入五到十倍体积的本产品,混均; 对病毒样品,加入两到三倍体积的本产品,
混均。
6. 将收集管存放于温度适当的地方,存放时间不能超该温度下的Z长存放时间。
如果要存放在-20℃或-80℃,需先在4℃放置过夜后再转移到温度条件(将
样品转移到-20℃或-80℃前,需要倒弃保护液)。注:样品存放温度与其Z长存
放时间关系为如下:
7. 取出样品,室温下融化(-20℃或-80℃保存的样品需先在室温下融化)。
8. 加入一倍体积的预冷的缓冲液 (如 PBS),用常规离心法收集细胞并用缓冲液
洗一次。病毒样品可免去此步骤。
9. 细胞直接用于 RNA 的提取或其他处理。
疑难解答
耐热型 MMLV 逆转录酶 (H-)大提柱式酵母 DNAout两栖类和爬行类动物种属鉴定 PCR Mix
鱼类种属鉴定 PCR Mix
鸟类种属鉴定 PCR Mix
哺乳动物种属鉴定 PCR Mix
植物种属鉴定 PCR Mix 1
植物种属鉴定 PCR Mix 2
植物种属鉴定 PCR Mix 3
植物种属鉴定 PCR Mix 4
植物种属鉴定 PCR Mix 5
植物种属鉴定 PCR Mix 6
植物种属鉴定 PCR Mix 7
植物种属鉴定 PCR Mix 8
植物种属鉴定 PCR Mix 9
植物种属鉴定 PCR Mix 10
植物种属鉴定 PCR Mix 11
转 ESPES 基因植物 PCR Mix
转 ESPES-NOs 基因植物 PCR Mix
转 Lectin 基因植物 PCR Mix
真菌种属鉴定 PCR Mix 1
真菌种属鉴定 PCR Mix 2
真菌种属鉴定 PCR Mix 3
真菌种属鉴定 PCR Mix 4
真菌种属鉴定 PCR Mix 5
真菌种属鉴定 PCR Mix 6
真菌种属鉴定 PCR Mix 7
古细菌种属鉴定 PCR Mix 1
真细菌种属鉴定 PCR Mix 2
古细菌 + 真细菌种属鉴定 PCR Mix 3
草杆菌 PCR Mix 4
高 GC 革氏阳性细菌 PCR Mix 5
链霉菌 PCR Mix 6
Poly r(A)
Poly(I).Poly(C)
Percoll
Ficoll-Paque 介质
Deaza dGTP
双脱氧 dNTP 套装
dNTP 和引物清除剂
鲁米诺
AMPPD
山羊抗小鼠 IgG(H+L), 碱性磷酸酶标记
山羊抗兔 IgG(Fc),碱性磷酸酶标记
山羊抗人 IgG(H+L),碱性磷酸酶标记
山羊抗大鼠 IgG(H+L),碱性磷酸酶标记
驴抗山羊 IgG,碱性磷酸酶标记
山羊抗兔 IgG(H+L),辣根过氧化物酶标记
山羊抗兔 IgG(H+L),辣根过氧化物酶标记
山羊抗小鼠 IgG(H+L),辣根过氧化物酶标记
山羊抗小鼠 IgG(H+L),辣根过氧化物酶标记
山羊抗人 IgG(H+L),辣根过氧化物酶标记
兔抗鸡 IgY,辣根过氧化物酶标记
驴抗山羊 IgG,辣根过氧化物酶标记
山羊抗小鼠 IgG,荧光素 488 标记
山羊抗小鼠 IgG,荧光素 555 标记
山羊抗兔 IgG,异硫氰酸荧光素标记
山羊抗兔 IgG,藻红蛋白标记
山羊抗兔 IgG,荧光素 488 标记
山羊抗兔 IgG,荧光素 555 标记
山羊抗小鼠 IgG,异硫氰酸荧光素标记
山羊抗小鼠 IgG,藻红蛋白标记
WarmStart Bst DNA 聚合酶
4× 核酸液相杂交液
DNA 溶解液
免 RNA 提取 FFPE RT-PCR 试剂盒
ECL 法生物素杂交检测试剂盒
猪铱隚����箥筥
核酸稀释液,测 OD 专用
工具酶缓冲液
EDTA 溶液,0.2M
Sulfolobus DNA 聚合酶 IV