通用型T载体克隆菌落PCR检测试剂盒 克隆与表达

名称：通用型T载体克隆菌落PCR检测试剂盒 克隆与表达
编号：ALH351
英文名：Universal T vector colony PCR identification Kit
规格：80次|400次
品Pai：百奥莱博
本试剂盒采用通用T载体引物研制的通用T载体菌落PCR鉴定试剂盒，只需购买一种试剂盒，便可用于市面上所有常见的T载体(包括pGEM，pUC，pBluescript系列) 连接阳性克隆的鉴定。此外，采用T3,T7或者SP6做引物的菌落PCR鉴定试剂盒引物距离插入位点的距离非常短，因此在鉴定100bp左右或者更小片段的插入时，阴性克隆的引物二聚体条带和阳性克隆扩增条带大小接近，无法区分。往往把引物二聚体的条带看成是阳性扩增条带，造成假阳性。反之，造成假阴性。本试剂盒通用T载体引物在未插入片段时的距离至少有150bp以上，加上插入片段的长度，可以清晰的区分是插入片段扩增出的条带还是引物二聚体扩增出的条带。避免假阳性或者假阴性，大大提高了准确性。本公司研发的一管便携式PCR MasterMix预混系统，无需您一一加入各种成分，直接加入需筛选单菌落，经过1小时左右的PCR反应和电泳检测即可得到重组菌落鉴定的结果。

试剂盒组份(400次)：
2 × Taq PCR MasterMix——————5ml
Universal primer F————————250μl
Universal primer R————————250μl
ddH2O———————————————5ml

注意事项：
1. 重组菌落鉴定时，挑取单菌落前，应先做好标记，便于鉴定后使用。
2. 挑取菌落时，应选择单菌落，不要挑取太多菌体，以免影响PCR 结果。
3. 设定PCR 程序时，请根据插入片段大小决定延伸时间，如果插入片段大小为1 kb以下，延伸时间30-45 秒即可，如果片段更长，可按此比例增加延伸时间。

储存条件：-20℃。

本品别名：通用型T载体克隆菌落PCR检测试剂盒|T载体阳性克隆检测试剂盒

更多有关通用型T载体克隆菌落PCR检测试剂盒 克隆与表达的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销售以下产品：

·粪便基因组DNA提取试剂盒
编号：ALH170
英文名称：Fecal genomic DNA Extraction Kit
规格：50次
本试剂盒适用于快速提取各种粪便DNA。常规的DNA纯化方式并不能有效地去除粪便中存在的大量YZ因子而导致下游实验的失败，如PCR不能扩增出所需片段。该试剂盒采用DNA吸附柱和新型独特的溶液系统，能有效去除动物粪便中各种影响下游实验(如PCR)的YZ因子，并能GX地回收粪便中的基因组DNA。动物粪便样品经特殊缓冲液ASL重悬后，70℃处理5分钟裂解细菌；离心去除不溶解的杂质，蛋白酶K消化进一步去除蛋白和杂质；然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤， YZ物去除液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除， 低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。

试剂盒组份(50次)：
缓冲液ASL—————————0.5ml
杂质清除剂AB———————50ml
结合液CB—————————20ml
YZ物去除液IR——————25ml
漂洗液WB —————————25ml
洗脱缓冲液EB ———————20ml
蛋白酶K——————————20mg
吸附柱AC —————————50个
收集管(2ml)————————50个

产品特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速，简捷，单个样品操作一般可在40分钟内完成。
4.多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.7～1.9，可直接用于PCR，Southern-blot和各种酶切反应。

注意事项：
1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 开始实验前将需要的水浴先预热到70℃备用。
3. 结合液CB 和YZ物去除液IR 中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA， 不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱， 但应该确保pH大于7.5， pH 过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA 应该保存在－20℃。DNA 如果需要长期保存，可以用TE 缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA 可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。
5. PCR 可能被过量的DNA（一般大于1μg）YZ，使用Z小用量的洗脱DNA（适当稀释）反而可以得到更好的扩增。一般加入的洗脱DNA 体积不要超过总PCR反应体积的10％。我们建议在PCR反应体系中加入终浓度0.1 μg/μl的BSA（牛血清白蛋白）有助于得到扩增效果。

储存条件：室温，有效期12个月。


通用型T载体克隆菌落PCR检测试剂盒 克隆与表达