酵母质粒小量提取试剂盒优惠价是高品质的DNA纯化,由北京百奥莱博供应,用于生化科学研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多酵母质粒小量提取试剂盒等DNA纯化产品请联系我司咨询订购。
名称:酵母质粒小量提取试剂盒优惠价
规格:50次
编号:ALH082
品Pai:百奥莱博
产地:国产|进口
英文名:Yeast high purity plasmid small amount rapid extraction kit
本试剂盒适用于酵母小规模高纯度质粒制备。采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞并结合lyticase特异消化酵母细胞壁,能在1小时内从酵母培养液中分离出高纯度质粒DNA。酵母收集后,加入破壁酶去除细胞壁后,然后碱裂法裂解细胞,离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低PH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA,再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除, 低盐、高PH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒组份(50次):
RNaseA(10mg/ml)—————————150μl
Lyticase————————————2500U
溶液YP1—————————————15ml
溶液YP2—————————————15ml
溶液YP3—————————————20ml
去蛋白液PD———————————25ml
漂洗液WB————————————15ml
洗脱缓冲液EB——————————15ml
吸附柱和收集管(2ml)———————50套
试剂盒特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯*(代'仿')等试剂,也不需要乙醇沉淀。获得的质粒产量高、纯度好,可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。
注意事项
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 溶液YP3和去蛋白液PD中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
3. 通常酵母质粒拷贝数都很低,高拷贝质粒得率一般为每5 ml 培养物提取1μg左右的质粒。用于下游试验时通常建议使用量为:1-5μl用做PCR 模板;5-10μl 用于转化大肠杆菌,选择GX率的感受态细胞。
4. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带,也可能为2条或者多条DNA条带,这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成, 与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。
5. 用户需要自备Sorbitol buffer( 1M 山梨醇, 0.1M Na2EDTA,14 mMβ-巯基乙醇)。配制方法:在600 ml 去离子水里面溶解182.2 克山梨醇,加入200 ml 0.5 M Na2EDTA (pH 8.0) ,不需要调节PH 值,定容到1L,4℃保存。临用前加0.1%β-巯基乙醇(商品化的β-巯基乙醇摩尔浓度一般为14M)。
6. 菌体浓度检测一般OD600值为1的时候,酿酒酵母细胞是1-2×10^7cells/ml,由于菌种和分光度计不同即使同样细胞数量OD值变化也很大,以上仅供参考。
7. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA,不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱,但应该确保批pH大于7.5, pH过低影响洗脱效率。用水洗脱质粒应该保存在-20℃。质粒DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
储存条件:室温,有效期12个月。
本品别名:酵母质粒小量提取试剂盒|高纯度酵母质粒提取试剂盒|高纯度酵母质粒制备试剂盒|
酵母质粒小量提取试剂盒|酵母质粒小量制备试剂盒
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·大量组织细胞DNA提取试剂盒
编号:ALH128
英文名称:Massive cells/tissue genomic DNA rapid extraction kit
规格:20次|50次
本试剂盒用于快速的从大量动植物细胞/组织中提取基因组DNA。样品研磨或者匀浆后加入细胞核裂解液,首先在强去污剂或者和蛋白酶K协同作用下裂解细胞释放出基因组DNA,接着加入RNase A去除RNA,然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白,纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。
试剂盒组份(20次):
RNase A(10mg/ml)——————360μl
细胞核裂解液————————180ml
蛋白沉淀液—————————60ml
DNA溶解液—————————10ml
产品特点:
1.不需要使用有毒的苯酚、氯*(代'仿')等试剂。
2.快速,简捷,组织样品操作整个过程可在1个小时内完成。
3.结果稳定,产量高(比离心柱型的产量高一倍以上),OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9,长度可达50kb-150kb,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应以及文库构建。
注意事项:
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到3,000xg,可容纳50ml 离心管的台式离心机。
2. 用户需自备异丙醇、70%乙醇、PBS(用于细胞)、液氮研钵/或匀浆器(用于组织)、水浴箱。
3. 开始实验前将需要的水浴先预热好备用。
4. 本试剂盒为溶液型,可以很容易的按照比例扩大或者缩小每次处理的组织细胞量,请联系我们索取其它处理量的操作手册。
储存条件:室温,有效期12个月。
酵母质粒小量提取试剂盒优惠价
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