无内毒素质粒大量提取试剂盒(高纯质粒)(柱式提取)多少钱是高品质的DNA纯化,由北京百奥莱博供应,用于生化科学研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多无内毒素质粒大量提取试剂盒(高纯质粒)(柱式提取)等DNA纯化产品请联系我司咨询订购。
名称:无内毒素质粒大量提取试剂盒(高纯质粒)(柱式提取)多少钱
品Pai:百奥莱博
规格:10次
产地:国产|进口
英文名:A large number of Endotoxin-free Plasmid Extraction Kit
编号:ALH090
本试剂盒适用于不含内毒素质粒的高纯度制备。采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞,粗提物通过独特的内毒素清除剂选择性结合离心除去内毒素,然后离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA,再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除,低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒组份(10次):
RNaseA(10mg/ml)-————————0.75ml
溶液P1—————————————77ml
溶液P2—————————————77ml
溶液N3—————————————77ml
内毒素清除剂——————————25ml
漂洗液WB————————————2×25ml
洗脱缓冲液EB——————————20ml
吸附柱和收集管(50ml)——————10套
试剂盒特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚,氯*(代'仿')等试剂,也不需要乙醇沉淀。快速, 方便,从100-200 ml大肠杆菌LB((Luria-Bertani)培养液中,可快速提取0.2-0.5mg纯净的高拷贝质粒DNA,提取率达80-90 %。
3.独特工艺配方清除内毒素,内毒素含量极低(<0.1 EU/μg DNA),细胞转染效果。也可直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序、等各种分子生物学实验。
注意事项
1. 所有的离心步骤如未加另外说明均在室温完成,使用转速可以达到12000g,带50ml转头的台式离心机。
2. 提取的质粒量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb 的大质粒,应加大菌体使用量,同时按比例增加P1、P2、N3 的用量,洗脱缓冲液应在70℃预热。可以适当的延长吸附和洗脱的时间,以增加提取效率。
3. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带,也可能为2条或者多条DNA条带,这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成,与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。
4. 质粒DNA确切分子大小, 必须酶切线性化后,对比DNA分子量Marker才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的的质粒,泳动位置不确定,无法通过电泳知道其确切大小。
5. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA,不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱,但应该确保pH大于7.5,pH过低影响洗脱效率。用水洗脱,质粒应该保存在-20℃。质粒DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
储存条件:室温,有效期12个月。
本品别名:无内毒素质粒大量提取试剂盒(高纯质粒)(柱式提取)|不含内毒素质粒大量提取试剂盒|无内毒素质粒大量制备试剂盒
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无内毒素质粒大量提取试剂盒(高纯质粒)(柱式提取)多少钱
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