名称:人源脱嘌呤/脱嘧啶(AP)核酸内切酶
规格:1000U
品Pai:百奥莱博
英文名:APE 1
编号:BTN130634
产品简介:
人源脱嘌呤/脱嘧啶 (AP) 核酸内切酶 APE1(Apurinic-Apyrimidinic Endonuclease I),也称为 HAP 1 或 Ref-1,与大肠杆菌外切酶 III 蛋白具有同源性。APE 1水解断裂脱嘌呤/脱嘧啶位点 5' 端的磷酸二酯键,产生单链 DNA 断裂,留下3' 羟基和 5' 脱氧核糖磷酸末端。除具有 AP 核酸内切酶活性外,据报道 APE1还具有弱的 DNA 3' 二酯酶、3' 到 5' 外切酶和 RNase H 活性。除 DNA 修复活性外,APE 1 还能通过一种氧化还原机制,体外调控许多转录因子的 DNA 结合活性。作为这个功能的一部分,APE 1 已被证实能刺激 Fos-Jun 异源二聚体、Jun-Jun同源二聚体、Hela 细胞AP-1 蛋白以及包括 NF-kB、Myb和ATF/CREB 家族成员在内的其它几种转录因子的 DNA 结合活性。
具体有下列特点:
1.单细胞凝胶电泳(彗星试验),彗星试验的推荐稀释倍数1:103 。
2.碱洗脱
3.碱解旋
4.改良切刻翻译
反应条件:
1X Buffer [50 mM KAc,20 mM Tris-Ac,10 mM Mg(Ac)2,1 mM DTT (pH7.9 @ 25℃) ],37℃ 温育。
单位定义:
1 单位指在 10 μl 总反应体系中,37℃ 条件下 1 小时,能切割 20 pmol 含一个单独 AP 位点*的 34 mer 寡核苷酸双链所需要的酶量。
*AP 位点的创建方法如下:37℃ 条件下,用 1 单位尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)处理 20pmol 含一个尿嘧啶碱基的 34 bp 寡核苷酸双链 2 分钟。
Buffer 成分:
10 mM Tris-HCl,50 mM NaCl,1 mM DTT,0.05 mM EDTA,200μg/ml BSA,50% Glycerol,pH 8.0 @ 25℃
热失活:
65℃ 20 分钟。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期一年。